在对新西兰兔进行静脉注射和肌肉注射氟苯尼考后的药代动力学研究.docVIP

在新西兰兔进行的氟苯尼考的药代动力学静脉注射和肌肉注射后 关键词：药代动力学、氟苯尼考、兔、血浆 摘要： 在向十只健康的新西兰白兔进行单剂量静脉注射和单剂量（25mg/kg体重）肌肉注射后，来测定氟苯尼考的药代动力学处置和生物利用度。用高效液相色谱测定血浆氟苯尼考浓度。氟苯尼考血浆药代动力学值最好由一个一室开放模型描述。在静脉注射和肌肉注射后，消除半衰期(t1/2b)不同(p 0.05)，而曲线下面积相似(p 0.05)。在肌肉注射后，氟苯尼考快速消除(t1/2b 1.49 ± 0.23 h),，缓慢吸收并变高(F, 88.75 ± 0.22%)。此外，在静脉注射后，氟苯尼考在体组织广泛分布。在此试验中，血液浓度超过2lg/mL浓度的时间接近6小时。对于细菌最低抑菌浓度为2lg/mL，在此剂量下需频繁注射来保持浓度超过最低抑菌浓度。然而，兔病原菌的最低抑菌浓度可能少于2lg/mL，则应考虑较少的注射频率。判定兔病原菌的最低抑菌浓度值以及判定用来预测有效剂量所需的最接近药效/药动学参数，需要进一步的研究。 1介绍 氟苯尼考是在兽医中用于治疗传染病的合成光谱抗生素。这是一种新抗生素，属于氯霉素家族，但仅使用于动物。通过抑制细菌蛋白质合成的化合物具有约束力的行为由50 S和70 S的核糖体亚基(Cannon et al., 1990)此外，氟苯尼考可预防细菌酶乙酰化，同时，这种产品比氯霉素和总蛋白有更有抗菌活性。由于其对于耐氯霉素病原菌具有活性，且不良反应较小，已被广泛利用于兽医门诊来治疗细菌病。 氟苯尼考的药代动力学处置已在犊牛、马、家禽、猪、鱼、羊上广泛研究，但是在兔子身上很少被证明。在此实验中，分析方法和剂量都与先前报道的两次实验不同。这次实验的目的是在向健康的新西兰白兔进行静脉注射和单剂量注射后，测定氟苯尼考（25mg/kg体重）血浆动力学处理和生物利用度。 2材料和方法 2.1 试剂和仪器 所有的溶剂均为高效液相色谱级，来自J.T. Baker（德文特，荷兰）。氟苯尼考（99.6%检测纯度）和氯霉素（99.7%检测纯度），可注射制剂（纽弗罗，300 mg/mL, 均来自商业的制备 氟苯尼考)）均由Schering-Plough (Segre, 法国)提供。 高效液相色谱由Thermoseparations Spectra Series供应。高效液相色谱系统包括P4000的梯度泵和Spectra System UV 6000 LP二极管阵列检测体系，Thermoseparations AS 3000自动进样器和Chromoquest 30软件。柱是逆向C18(4.6 _ 250 mm, 5 lm 粒径)，由Phenomenex（加利福利亚，美国）供应。 2.2动物和实验设计 在实验中，需要十只6-12月大小健康的兔子（新西兰白兔）。在十只兔子中，五只为雌性 (2.50 ± 0.41 kg),五只为雄性(2.78 ± 0.35 kg)。实验前，它们被放在Ataturk大学的实验研究中心两周，用颗粒饲料（无抗菌能力）和水来喂养。动物实验遵守在Ataturk大学伦理委员会制定的指南，以符合伦理的方式进行。 兔子被分为两组（n=5，每组）。在静脉注射和肌肉注射前，在每个动物的缘静脉放置抑制装置。血样（2ml）从用于控制的抑制装置采集。接下来，在第一组中，单剂量肌肉注射氟苯尼考（25 mg/kg体重）注入肌肉组织。每只兔子的血样均从抑制装置采集，药品注射后，在5，10，15，30，45，60，90分钟，2，4，6，8，12，18和24小时收集含肝素作为血凝剂的管中的血样。在第二组中，将单剂量（静脉注射）氟苯尼考（25 mg/kg体重）注入缘静脉。每只兔子（耳朵另侧）的血样均从抑制装置采集，同时收集含肝素作为血凝剂的管中的血样。将样本在采集的一小时内离心并且将血样冷冻储藏(-20 ℃)直到分析时。在实验的一周内，将所有的样本进行分析。 2.3 分析方法 色谱法按Kowalski et al. (2005)描述的进行。在分析中，氯霉素被用作内标法。 流动相包括乙腈-水以25:75 (v/v)比例的混合物并适应包含85%正磷酸的2.7pH。注射的体积为20 lL，监控波长为224nm， 柱温为24-25℃，流速为1.5 mL/min. 校准曲线范围为0.1_25.0 lg/mL（n=6），氯霉素 (内部标准) 添加浓度为 0.5 mL at 10.0 lg/mL 2.4 样品制备 提取程序也如Kowalski et al. (2005)的描述。简要为，将冷冻的血样（0.5ml）在25℃（室温）下解冻，加入0.2ml 1.0M氢氧化钠和3ml乙酸乙酯。在1650g时混合物融合并离心15分钟。在200g时继再次离心10分钟,20mL注入HP