红细胞不规则抗体筛查常用方法选择分析.docVIP

精品论文 参考文献 红细胞不规则抗体筛查常用方法选择分析 庞新丰 乔静 (焦作市妇幼保健院检验科儿科 河南焦作 454000) 【摘要】目的 探讨筛选红细胞血型不规则抗体筛查的最佳方法及意义。方法 凝聚胺法(Polybrene)、蛋白水解酶法.抗人球蛋白法、微柱凝胶免疫法进行不规则抗体筛选及灵敏度，特异性鉴定。结果　除蛋白水解酶法以外其他三种方法均能全部检测出IgG型抗体,阳性符合率为100%。但灵敏度有所差异。结论 各种血型血清学试验都有其自身的特点,适用于不同范围及不同情况。 【关键词】抗体效价 不规则筛查 输血安全 酶法 凝聚胺法 抗人球蛋白法 微柱凝胶免疫检测法 不规则抗体引起输血不良反应、新生儿溶血病、疑难配型等的主要原因之一。对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者作抗体筛选试验发现有临床意义的不规则抗体,从而避免输血的不良反应,保证临床用血的安全,特别是对有输血史和妊娠史的择期手术患者有更为重要的临床意义。本文采用微柱凝胶法、凝聚胺法和 LIM抗人球法，蛋白水解酶法，进行不规则抗体检测。 一、材料仪器 1.聚凝胺试剂盒　由珠海贝索生物技术有限公司(台资)提供, 2.酶技术相关试剂　抗人球蛋白，菠萝酶粉剂均由上海血液生物医药有限责任公司提供, 3.抗体筛查细胞由长春博迅生物医药有限责任公司提供，由 3 个细胞组成，包括 Rh，Kidd，MNSs，Duffy，Diego，Kell，Lewis，P等8个血型系统的19个抗原互补; 凝胶卡专用离心机、孵育器由长春博迅公司提供。 4.不规则抗体抗-D、E、C、c、e、S、s、K、Fya、Fyb、Jka、Jkb、M、N、P1来自加拿大Dominion公司。　 二、试验方法 1.抗体效价测定　使用商品的筛选细胞分别采用微柱凝胶法、凝聚胺法、蛋白水解酶法，抗人球蛋白法对倍比稀释后的各种抗血清进行检测，比较四种实验方法对不同血型系统抗体的敏感性测其效价,以最高稀释度且凝集ge;1+者为效价终点。同时用该试剂红细胞与正常献血者血清反应,作为阴性对照试验，见表1。 2.四种方法所用血清量和实验时间的比较见表2。 三、结果：方法1为微柱凝胶免疫法，方法2为凝聚胺法，方法3抗人球蛋白法，方法4为蛋白水解酶法 表1 4种实验方法测定不同血型系统抗体效价比较 表2 四种方法所用血清量和实验时间的比较 四、讨论 本试验显示,微柱凝胶法灵敏度略优于抗人球法，凝聚胺法对有些血型系统灵敏度又高于其他两种方法，对于Lewis 血型系统凝聚胺法灵敏度明显低于其他两种方法。 酶技术特别适合于检测有重大临床意义的Rh系统抗体,但不能检出抗-M、N、S、s、Fya、Fyb,这是因为酶可以破坏红细胞膜上的MNSs、Duffy系统抗原,会造成这类抗体漏检。试验还表明,酶试剂本身活性易失效,不易保存。另外酶技术应用过程中会受唯酶抗体的干扰。此次试验说明酶技术不适合用于常规的不规则抗体筛选试验。 抗人球蛋白实验是世界公认检测红细胞不规则抗体的经典方法,但孵育时间太长,需洗涤红细胞太烦，因此不适用于大批量筛查，只能将该实验方法用在对少数标本的确定中。 凝聚胺法灵敏度高、价廉、快速，且操作简单方便，对血型抗体敏感性(除抗-K外)均超过传统盐水,抗人球蛋白法、酶法,缺点是凝聚胺结果不好判断,要有丰富的实际操作经验，操作中也不能剧烈晃动,会使弱凝集消失,误判为阴性。且对Kell系统抗体不够敏感。出现弱阳性的标本还要做抗人球蛋白法,以此结果为准。 微柱凝胶法干扰因素少，操作法简单、方便、敏感性高，结果易判断又能较长时间保存，标本用量少，又能同时检测多份标本。但该方法需配备专用的离心机及孵育器,价格昂贵。相对于其他两种方法成本较高。 五、结论 由于每种方法都有其各自的优点和不足,不同的实验室应从自己的实际情况出发,选择适合自己实验室的方法,以保证临床输血的安全。我院常规用血、备血用微柱凝胶免疫法,而急诊用血比较急,用凝聚胺法作为补充能比较快速的筛选不规则抗体。对于基层实验室可用凝取胜胺法进行常规筛检，遇到阳性标本再用微柱凝胶法或 抗人球法复检。 参 考 文 献 [1]李勇主编.实用血液免疫学血型理论与实验技术.北京:科学技术出版社，2006． 595． (2)董永,李延年,孙波等.微柱凝集法筛选不规则抗体的临床应用 中国输血杂志 2003,16(5):327. (3)孙爱农,许惠根,吴晓燕,