对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞的影响研究.pdfVIP

‘ 2．5犬瘟热 ， 犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的以呼吸道症状和皮肤过度角质化为主的高度传染性疾病，对于未免疫 犬，特别是幼犬，往往是致死性疾病。病犬表现咳嗽，流脓鼻涕，肉垫角质化以及高热，后期出现抽搐样 神经症状。常规治疗成功率极低，结合灌肠法可提高治愈率。 在常规抗菌抗病毒治疗过程中，对高温犬反复进行大量不保留灌肠，使犬体温维持在较低水平，同时 每天两次保留灌肠。灌肠液选用抗病毒类药物以及清热解毒的中药，如板蓝根、金银花、牡丹皮、知母等。 对于出现神经症状或兴奋型病犬，可用10％水合氯醛进行镇静催眠。 3灌肠注意事项 灌肠所用溶液需要加温，温度与体温保持一致，过热会损伤肠粘膜，过冷会引起肠道痉挛，以降温为 目的除外。 输入灌肠液的量要根据犬的大小以及灌肠类型而定，大量不保留灌肠法灌入量以犬有不适反应时为 止；保留灌肠的药液量尽可能量小。严重病犬或休克犬酌情加量，但须密切观察病理变化。 灌肠压力不能太大，采用灌肠筒灌肠时，液面离肛门高度为30～50cm比较合适，如用注射器法必须 掌握好力度，如果力量过大，灌入速度太快，很容易造成肠壁破裂。 对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞的影响 鞠雷，顾宪锐，刘占民，钟秀会，马玉忠 (河北农业大学动物科技学院，河北保定071001) 摘要：研究对乙酰氨基酚对体外培养的大鼠原代肝细胞的影响，铒：讨对乙酰氨基酚导致肝损伤的机制， 为临床上合理地利用保肝药物提供理论依据和数据．选用成年sD大鼠，胶原酶两步灌流法获取大鼠原代 肝细胞，待肝细胞稳定后，用不同剂量的对乙酰氨基酚处理肝细胞，MTT法测定肝细胞的存活率，分光光 度法测定培养上清液中一氧化氮(NO)和肝细胞内的丙二醛∞A)的含量．结果表明：对乙酰氨基酚可导 致肝细胞存活率降低，在2-20raM对乙酰氨基酚浓度范围内，肝细胞存活率随对乙酰氨基酚浓度的增高而 呈下降趋势；说明在过量时，对乙酰氨基酚对肝细胞有损伤作用，并随浓度升高而损伤作用加重．对乙酰 O．05)．不同浓度的对乙酰氨基酚处理后，各处理组MDA含量变化不明显．对乙酰氨基酚导致肝细胞损 伤，存活率下降；NO含量升高，轻微升高可以缓解氧化损伤，大量增加又导致肝损伤；MDA变化不明显， 所以脂质过氧化反应不是引起肝损伤的主要原因． ． 美奠词：对乙酰氨基酚；大鼠；原代肝细胞：NO；MDA 大部分在肝内可以通过与葡萄糖醛酸和硫醇结合迅速代谢，只有少部分被细胞色素酶P450氧化生成N-乙 然后与肝实质细胞内的蛋白质和DNA共价结合，从而导致严重肝损伤口1。人们对醋氨酚进入体内起始的生 化和代谢过程研究的已经较为透彻，但对导致肝损伤的机制还不清楚。现在研究证实许多因素在肝损伤过 程中发挥作用，比如过氧化反应、线粒体机能障碍H1、ATP的合成减少和Ca2．释放增加垤1等等。 用对乙酰氨基酚和四氯化碳制备经典的肝损伤模型，来研究肝毒物质致肝损伤的机制，保障人和动物 261 武汉华中农业大学 2006．10 的健康生活嘲。许多试验以活体动物作为研究对象，去研究血清以及肝组织匀浆中肝功能指标的变化，去 揭示导致肝损伤的机制，但实验动物个体差异的存在，使肝损伤机制的研究受到局限。体外培养的大鼠原 代肝细胞具有大部分活体功能，而且不存在个体以及环境差异等问题，在研究肝损伤机制和筛选保肝药物 的试验中应用越来越广泛。有关学者利用新鲜分离的小鼠肝实质细胞研究了AP诱导的肝损伤机制Ⅲ，以及 IL-I B对肝损伤的保护作用删。但以大鼠肝细胞来研究肝损伤的机制还比较少。 本文利用原代培养的大鼠肝细胞作为研究对象，通过NO、MDA含量的变化，来探索AP诱导肝损伤的机 制。 1材料和方法 1．1动物成年SD大鼠，雄性，清洁级，体重200～2509，购自河北省实验动物中心。 MEDIUM 1．2主要试剂WME(WILLIAM’S 公司产品。胎牛血清(FBS)购自天津市正江高科动技术有限公司。丙二醛(如A)试剂盒和一氧化氮(N0) 购自中国药品生物