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济 宁 医 学 院 实 验 教 案 2005~ 2006学年 第 2学期 所在单位 基础部 教 研 室 医学微生物教研室 课程名称 医学微生物学实验 授课对象临、护、预、药本科 授课教师 薛庆节 职 称 助教 教材名称医学微生物实验指导 2006 年 2 月 12 日 教案首页 章节 实验一 讲授内容 油镜的使用 革兰氏染色 学时分配 2学时 教学目的 使学生熟悉革兰染色的原理、意义； 掌握油镜的使用方法以及革兰氏染色的方法、步骤。 教学重点 油镜的使用方法以及革兰氏染色的方法、步骤。 教学难点 油镜的使用正确性。 教学方法 演示法·讲授法·比较法·提问法 教具准备 大肠杆菌、葡萄球菌、光学显微镜、革兰染液、擦镜纸、吸水纸、镜油、玻片 教学参考资料 《医学微生物学实验指导》 人民卫生出版社 《医学微生物学》五年制本科教材 人民卫生出版社 教学后记 显微镜对号入座、镜橱及时锁好，加强对学生显微镜使用方法的指导 教学过程 教师活动 教学内容 学生活动 备注 【引入】 【讲授新课】 【演示并讲述实验步骤】 【设问】 【检查指导】 【讲述 【讲述】 作业： 微生物的定义（回顾） 革兰氏染色法是丹麦细菌学家革兰于1884年发明的，至今已逾百年，但仍在广泛应用，是细菌学中最为经典的染色法。此法可将细菌染成两大类：革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，这对于鉴定细菌，研究细菌的致病性，选择敏感的抗生素均有一定的意义。 革兰氏染色法的原理尚不完全清楚，主要有三种学说： 等电点点学说 通透性学说 化学学说 比较公认的是通透性学说：革兰氏阳性菌细胞壁结构比较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入反而可使细胞壁脱水而形成一道屏障，阻止染料向细胞外渗。革兰氏阴性菌细胞壁疏松，肽聚糖层很薄，而外膜、脂蛋白、脂多糖均含有大量的脂质，易被乙醇溶解，致使细胞壁通透性增加，细胞内的结晶紫—碘复合物容易被乙醇溶解而脱出。 步骤： 初染 媒染 脱色 复染 镜检 注意：干燥最好在自然条件下进行干燥，干燥和固定是两步，初染和媒染后，可使结晶紫和碘形成复合物。 革兰染色时，关键的环节是脱色，脱色不够，革兰氏阴性菌可染成阳性菌，脱色过度，革兰氏阳性菌可呈现阴性菌的结果，恰当的脱色须通过实践掌握。 油镜放大1000倍 镜检完毕，用擦镜纸擦去油渍，再用二甲苯拭去，用擦镜纸擦干。 严格按步骤操作： 总结并打扫卫生 革兰染色的原理、步骤、意义是什么？ 学生观察、思考并回答问题 积极思考 观察并记忆 （约20分钟） 复习巩固并导入新课 教与学的互动能活跃课堂气氛 约5分钟 举例说明重要性，从而激发学生的学习兴趣。 (约15分钟) （约25分钟） （约5分钟） 板书设计：取材 干燥、固定 媒染 洗脱 复染 油检