HPLC法测定康乐鼻炎片中黄芩苷的含量研究.pdfVIP

HPLC 法测定康乐鼻炎片中黄芩苷的含量 李英 王晓南 洪梅 (吉林省药品检验所 吉林长春130062) 摘要 目的 建立高效液相色谱法测定康乐鼻炎片中黄芩的含量 方法 采用Diamonsil C18 色谱柱(4.6 250mm 5 m )甲醇 水 磷酸 ( 50 50 0.2)为流动 相 流速1.0mL.min 1 检测波长278nm 结果 黄芩苷在0.0249~0.2239 g 范围内 峰面积与 其浓度线性关系良好 r =0.9998 平均回收率99.07% RSD 为0.52% 结论 本法方法简便 准确 重复性好 可用于该制剂的质量控制 关键词 黄芩苷 康乐鼻炎片 高效液相色谱法 康乐鼻炎片系由苍耳子 辛夷 白芷 麻黄 穿心莲 黄芩 防风 广麝香等十一味药物组成的复方 制剂 具有疏风清热 活血驱瘀等功效 本试验是测定处方中黄芩的有效成分 黄芩苷的含量 采用高效 液相色谱法 快速 准确 精密度高 重现性好 1.仪器与试药 LC 10AT 高效液相色谱仪 class- 10 色谱工作站 黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供 批号0715 9909 为含量测定用 甲醇为优级醇试剂 其它试剂均为分析纯试剂 2.色谱条件 色谱柱 Diamonsil C18 4.6 250mm , 柱温 35 流动相为甲醇-水- 磷酸 50 50 2 流速 1.0ml/min,检测波长278nm 理论板数12820 在该色谱条件下 样品可以得到很好的分离 且无杂质峰干 扰 图1 3.试验方法与结果 3.1 阴性对照试验 取不含黄芩苷的阴性样品适量 按样品法测方法测定 结在与黄芩苷峰相应的保 留时间 无干扰峰检出 3.2 线性关系考察 精密吸取黄芩苷对照品 0.02488mg/ml 1 3 5 7 9 l 进样 按上述色谱条件测定 以色谱峰面 积值为纵坐标 黄芩苷进样量为横坐标 作图 结果呈良好线性关系 线性范围0.0249~0.2239mg 回归方 程y=2817926.0X+16666.2 r=0.9995 3.3 精密度考察 精密吸取同一对照品溶液 连续进样5 次 结果5 次进样的RSD=1.18%表明仪器的精密度良好 3.4 稳定性考察 取同一供试品溶液 依次在0 2 4 8 24 小时测定 结果供试品溶液在24 小时内基本稳定 RSD=1.20% 3.5 重复性试验 精密称取同一批号的样品5 份 按含量测定项下的方法测定 结果含量平均值为6.73mg/片 RSD=2.01% 3.6 加样回收率试验 精密称取已知含量的供试品 含量 24.2249mg/g 五份 精密加入黄芩苷对照品约5.9mg 依法测定 加样回收率 结果测得平均回收率99.26% RSD=0.39% 4. 样品的测定 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量 加甲醇制成每1ml 含12 g 溶液 即得 供试品溶液的制备 取本品10 片 除去糖衣 称定重量 研细 精密称取0.5g 加70%乙醇30ml 加热回流1 小时 放冷 滤过 滤液置100ml 量瓶中 用少量70% 乙醇分次洗涤容器残渣 洗液滤入同一 量瓶中 加70% 乙醇至刻度 摇匀 精密吸取5ml 置 10ml 量瓶中 加70% 乙醇稀释至刻度 摇匀 即得 测定法 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 l 注入液相色谱仪 即得 按上述色谱条件 测定了三批样品 每批平均测定2 份 结果见表1 表1 样品测定结果 批号 黄芩苷含量 mg/片 平均含量 mg/片 1 1.305 1.268 1.29 2 1.493 1.507 1.50