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HPLC法测定龙眼肉中的几种核苷类物质研究.pdf

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-j.眉中国中西部地区色谱掌术交流会 “ 2006年8月 HPLC法测定龙眼肉中的几种核苷类物质· 肖维强1, 黄炳雄1,.王晓容h‘, 张慧k,2戴宏芬1 。 (I.广东省农业科学院果树研究所,广州510640,2华中农业大学植物科技学院) 1 x ■耍:建立HPLC法测定龙最内中藤警.屎普和藤曝呤的含量.秉用Nucl00|iC18反相桂(250M4R),以0.Olmol/L的【HtPO.: 相关系数r-I,回收事97.49%.RSD 法何便快速.线性关系良好. 关键词:HPLc.龙曦;腺苷:屎普;腺嚎呤 龙眼(D/mocarpuslonganLour)是无患子科龙眼属常绿乔木果树,为我国南方的特色 大宗水果,种植面积约80万公顷Ⅲ,主要分布于福建、广东、广西、四川和台湾省,在我国已 有千余年的栽培历史.龙眼俗名桂圆,别名龙目、比目、益智、圆眼等,是搿果中圣品一,具 有“南方人参一的美称,人们常把它作为保健食品和滋补药品,但龙眼肉的主要药理活性成分 究竟是什么,目前还没有确切的答案.成熟的龙眼肉营养丰富,主要的营养成分有总糖、还原 糖、蛋白质、_维生素C等垤1。据有关报道,龙眼肉还舍有酒石酸、栎素‘、单宁,近年又从中分 离到五环三萜类物质¨1。 药用作用显著,具有抗凝血、扩张冠状动脉、镇静中枢神经和抗心率不齐等作用Ⅲ,常作为虫 草主要有效活性成分之一哺1,是冬虫夏草及代用品的质控指标.龙眼作为滋补品,与上述滋补 本文采用高效液相色谱法,建立了龙眼肉中3种核苷类物质的分离测定方法. 1材料与方法 1.1标准品、仪器及试剂 1.1.1标准品 腺苷购自美国sigma公司,国内分装。含量99%:尿苷购自中国药品生物制品检定所,批 分装,含量I98%.为便于计算,以上3种标准品在试验中均按含量100%计算。 1.1.2主要仪器及试剂 。 紫外/可见分光光度计:美国PE公司Lambda35型紫外/可见分光光度计。 检测器,手动进样器,20肛L定量管.1 分离柱:德国MACHEREY--NAGEL公司产,填料为Nucleosil 柱。 作者简介t肖维强(I%8一).男。高级实验师.主要从事累品匀Ⅱ工及水果中保健成分的分析. 282 首届中国中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 水器过滤而得;其余试剂均为国产分析纯。 ’ 1.2分离条件的确定: 1.2.1标准品吸收波长的确定’ ‘ 分别称取适量的腺苷、尿苷和腺嘌呤标准品,用水溶解并稀释至100弘g/mL左右,在分光光 几种核苷类物质的分离波长川。 1.2.2几种核苷类物质液相色谱条件的确定 根据参考文献中的测定方法H’61略作改进。将标准品配制成含量1腿/ml的水溶液,根据 紫外扫描结果,选定检测波长和配比不同的流动相,根据分离出的峰形、峰面积、保留时间等 结果及待测品中几种核苷物质与杂质的分离度,改变流动相的配比。以期得到最佳峰形、合适 的保留时间和廉价的流动相配比。试验中采用外标法,每个样品连续进两针.两针相对的响应 值变化应小于1.5%。 1.3线性关系试验 按确定好的分离条件分别进样,根据标准品的浓度和峰面积,经化学工作站或用Excel软件计 算,得线性回归方程和相关系数。 ’ 。 1.4样品的处理方法 , 将新采的龙眼去皮和核, 峰面积计算龙眼肉中几种核苷类物质的含量。 1.5精密度试验 。 、 . 选择

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