HPLC法测定去甲乌药碱的含量研究.pdfVIP

HPLC 法测定去甲乌药碱的含量 1 1 2 2 1 1 1 陈宝玲 郑英丽 陆直 刘爱茹 顾德良 方丽 张正 (中国医学科学院1.阜外心血管病医院药剂科 北京 100037 2.药物研究所 北京 100050) 摘要 目的 改进去甲乌药碱原料药的HPLC 测定方法 为其质量控制提供快速 有效的分析手段 方 法 采用Alltech公司Apollo Phenyl 色谱柱(5m, 4.6mm 150mm) 以0.05molmL- 1磷酸盐缓冲液(pH 3.0)- 乙腈(90:10)为流动相 流速1.0 mLmin- 1 紫外检测波长284nm 考察了不同色谱柱和流动相下主药与 杂质的分离状况 同时进行了专属性 线性关系 精密度等项的考察 结果 去甲乌药碱在 0.010.50mgmL- 1 范围内线性关系良好(r=0.999 9) 最低检测限为0.5ng 样品溶液在96h 内稳定 日内 RSD 为0.99 % 日间RSD 为0.36 % 相关杂质与去甲乌药碱分离良好 结论 该方法专属性强 简便 快速 结果准确 可用作去甲乌药碱原料药的含量测定 关键词 去甲乌药碱 含量 高效液相色谱法 去甲乌药碱(HG)是中药乌头中存在的一种强心有效成分 已由中国医学科学院药物研究所黄龙珍等 [1] [2,3] 人化学合成 研究表明 去甲乌药碱对心血管系统有正力性和正时性效应 其特性类似于多巴酚丁 [4] 胺 有可能成为一种有前途的临床心肌负荷药物 医科院药物所现采用C18 柱进行原料药的含量测定 和有关物质检查 但该方法测定时间比较长 本文参照该高效液相色谱条件加以改进 采用Appllo Phenyl 色谱柱 以0.05molmL- 1 磷酸盐缓冲液(pH 3.0)- 乙腈(90:10)为流动相 紫外检测器在284nm 下检测 结 果表明 该法简便 快速 准确 适用于去甲乌药碱原料药的测定 1 仪器与试药 高效液相色谱仪(岛津LC-6AD泵 SPD-6A紫外检测器 CTO-6A柱温箱 SIL-6B自动进样器) ChromStation色谱工作站 去甲乌药碱(批去甲乌药碱对照品(纯度99.8%)原料药 和相关杂质均由中国医学科学院药物研究所提供 乙腈为色谱纯 水为重蒸水 其它试剂均为分析纯 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱 Alltech公司Appllo Phenyl 色谱柱(5m, 4.6mm 150mm) 流动相 0.05molmL- 1 磷酸盐缓冲液(pH 3.0)- 乙腈(90:10) 流速1.0 mLmin- 1 检测波长284nm 进样量为 10L 2.2 原方法与本方法测定去甲乌药碱的色谱图 图1 原测定方法的色谱图(A) 本测定方法的色谱图(B) Fig 1 Chromatograms of Oringinal method(A)and present method(B) 1. 去甲乌药碱 (higenamine) 2. 杂质I (impurity I) 3. 杂质II (impurity II) 1 2.3 降解产物的检出 取去甲乌药碱原料药5mg 置于 10mL 量瓶中 分别进行热降解(120C 加 - 热24 h) 酸降解(加10%盐酸溶液1mL 60C 加热24 h) 碱降解(加0.1molL 氢氧化钠溶液0.2mL)和 氧化降解(加30%双氧水0.1mL 60C 加热1 h