HPLC法测定硫普罗宁及其制剂有关物质的方法学研讨.pdfVIP

HPLC法测定硫普罗宁及其制剂有关物质的方法学研究 刘津爱 王明新 中国医药研究开发中心有限公司 北京 100083 摘要 目的 采用高效液相色谱法测定硫普罗宁及其制剂的有关物质 方法 采用Lichrospher C 色谱 8 柱 5 um,4.6 mm x 250 mm ,以乙腈-水 93 7 以磷酸调pH 至2.2 为流动相,流速1.0 ml min- 1 紫 外检测器于205nm测定 结果 最低检测限0.1ng制剂中辅料不干扰有关物质的检测 结论 采用HPLC 法测定硫普罗宁及其制剂的有关物质的方法简便 结果可靠 关键词 硫普罗宁 有关物质 高效液相色谱法 硫普罗宁 tiopronium 硫普罗宁是带有活性巯基的甘氨酸衍生物 是一个很有效的抗氧剂 它主要 通过清除有害自由基 补充体内谷胱甘肽平衡 螯合金属离子和调节体内抗氧化酶体系发挥抗氧化作用 从而降低肝细胞结构与功能 参与肝细胞物质 蛋白质 糖 代谢 维持肝细胞内谷胱甘肽浓度 抑制 肝细胞线粒体过氧化脂质体形成 保护肝细胞膜 是国内临床常用的肝功能改善剂和代谢解毒剂 首先 在日本上市 而后德 意 美 瑞士等国家相继作为改善肝功能药物应用临床 国外长期使用证实 该 药能全面 明显改善病毒性肝炎 酒精性肝损伤的肝功能指标及有关症状 具有疗效确切 安全可靠等 特点 在部颁标准中硫普罗宁的有关物质检查采用的是薄层色谱法 由于考虑到检测灵敏度 我们采用 高效液相色谱法对本品的有关物质检查方法进行了研究 1.仪器与试剂 高效液相色谱仪 Shimadzu Lc- 10AT VP 泵 Shimadzu SPD- 10A VP 紫外多波长检测器 TL-9900 色 谱工作站 硫普罗宁 批号:030521 030525 030530 河北万荣亿康医药有限公司 中间体 2-氯-3- 酰氨-1-戊酸 中间体 2- 1-乙酰基巯基 3-酰氨-1-戊酸 河北万荣亿康医药有限公司提供 硫 普罗宁的冻干粉针 批号:031004-2 为市售品种 河南省新谊药业股份有限公司 乙腈为色谱纯 磷酸为分析纯 实验用水由Millipore,水纯化系统所制 2.色谱条件 色谱柱 Lichrospher C8 色谱柱 5 um,4.6 mm x 250 mm 流动相 以乙腈-水 93 7 以磷酸调 - 1 pH 至2.2 为流动相 流速 1.0ml min 检测波长 205nm 进样量 10ul 柱温 室温 1 3.方法的专属性考察 通过对硫普罗宁主产物 合成中间体及降解产物进行HPLC分离检测 结果表明采用HPLC法测定硫 普罗宁的含量及有关物质的方法专属性良好 见图1 A B C D 图1.HPLC方法专属性考察 Fig 1. The exclusion inspection of HPLC detective method A.硫普罗宁与中间体混合进样图 mixture of tiopronium and its intermediates B.酸加热破坏样品 sample of tiopronium destroyed by acid and water bath warmed for 30 min C.碱破坏样品 sample of tiopronium destroyed by alkali and water bath warmed for 30 min D.氧化破坏样品 sample of tiopronium destroy