毛细管色谱法测定植物油脂肪酸组成方法研讨.pdfVIP

中国粮油学会第五届学术年会论文选集 265 毛细管色谱法测定植物油脂肪酸组成方法研究 王江蓉1刘 荣1周建平2张令夫1黄力1 (湖南国家粮食质量监测中心1，长沙410005) (湖南农业大学食品科学技术学院2，长沙410128) 摘要直接使用常见油料植物种子制备纯油甲酯进行分析，对比了强极性和弱极性的两种不同类型 毛细管柱的色谱分析条件，然后选用AC20强极性毛细管柱进行实验研究，探讨了设置GC色谱仪器操作条 件对色谱分离及峰高、峰面积、保留时间的影响，确定了最佳的色谱条件，并将所测定的主要脂肪酸含量与 国家标准所提供的含量范围进行了比较，结果较为吻合，而且平行测定的相对标准偏差表明方法有较好的 精密度和重复性。本论文所测ECL值经与文献标准值对照，差别很小，说明本实验操作系统是稳定和可靠 的。通过本研究试图得到一种能够检测大批量样品的简单、快速、准确的植物油脂肪酸组成分析方法。 关键词植物油脂肪酸组成毛细管气相色谱法最佳色谱条件 油脂中脂肪酸的组成分析是油脂研究中常见的分析项目之一。由于不同的油脂有不同的脂肪酸组成， 脂肪酸的构成直接影响油脂的性质，脂肪酸之间的区别主要是在其碳链上含碳数量和不饱和键的多少，以 及不饱和键的位置不同。目前测定脂肪酸组成的分析方法主要是气相色谱法，气相色谱可利用其色谱柱将 脂肪酸甲酯按碳原子数，或不饱和键的数量多少来进行分离和测定。目前对于植物油脂肪酸的分析，通常 柱【1之]。但由于填充柱的柱效不高，且分析时间长，如硬酯酸、油酸等组分往往分离效果不佳…3。近年来毛 细管色谱柱的应用越来越普及，因为毛细管柱的柱径小，柱较长，因而柱效高，能使脂肪酸组分在柱内进行 反复分配，并得以完全分离，因此本研究我们采用毛细管气相色谱法测定。对油脂的脂肪酸组成进行分析， 先要制备出脂肪酸甲酯，以降低沸点，提高其稳定性，然后进行气相色谱分析【4-5】。通常气相色谱分析应先 测定标准品，再测定样品，通过与标准品进行比较来进行定性及定量，但由于脂肪酸甲酯标样十分昂贵，且 不易保存，本研究在参考文献的基础上，直接由油料种子制备甲酯，选用两种不同极性的毛细管柱进行分 照，差别很小，同时还重点探讨不同色谱条件对色谱分离或检测响应值(峰高、峰面积、保留时间)的影响。 通过优化色谱条件，可以使复杂的脂肪酸组分得到良好分离，提高仪器检测灵敏度和缩短分析时间。 l 材料与方法 1．1材料与试剂 油茶籽、花生、大豆、本地油菜籽(优化色谱条件时只选用脂肪酸组成丰富的菜籽为实验样品) moL／L 试剂：NaCI、0．4 KOH甲醇溶液、石油醚、乙醚溶液(试剂均为分析纯) 1．2仪器及测试条件 HP6890气相色谱仪；FID氢火焰检测器；10 m， 柱径0．25innl，液膜厚度0．22 rn，柱径O．25咖，液膜厚 tan)；Agilent公司唧一5石英玻璃毛细管柱(柱长30 度0．25胛)载气N2(纯度99．999％)；分流比50：1；燃气I-12：40mlJmin；Air：400mL／min；进样12I：260℃；检测 器：260℃： 1．3试验方法 266 中国粮油学会第五届学术年会论文选集 1．3．1植物种子脂肪酸的快速甲酯化【4-7】 将油菜籽种子、油茶籽、花生、大豆干燥后，取200—1000 mL具塞试管中，加入石油醚 mg，研碎后放人10 min后，再加入0．5 mL，振摇后置于50℃水浴约 一乙醚(1+1)2mL，浸提15 moL／L的甲醇钠一CHaOH溶液1 15min，取出后沿管壁加入5％NaCI溶液使有机层上升至试管上部，静置分层后，取上层清液1 vL作气相色 谱分析。 1．3．