海洋放线菌产铁载体活性及其对抑菌性的影响研究.pdfVIP

接毽覆付 第三屠海洋生镌高技术论坛 2005．08．19-23 海洋放线菌产铁载体活性及其对抑菌性的影响+ 游剑岚1刘广锋1林永成2周世宁1‘ 0275； 1申山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室生化系；广州51 2 中山大学化学与化工学院应用化学系，广州510275 摘要：从海洋环境分离到一批放线菌，从中筛选到具有强抗菌活性的菌株，其中一些具有抗菌 活性的菌株能产生铁载体物质，并证明其抗菌性与竞争铁有关。通过平板对峙和共培养实验， 发现铁营养竞争是产铁载体放线茵A03抑制对虾致病茵—哈维氏弧茵H的机制之一。 关键词：海洋放线菌， 铁载体， 抗茵活性 对于大多数生物来说，铁是一种必须的营养因子。许多微生物在缺铁条件下，利用铁载体 菌常常通过产生结合铁离子能力更强的铁载体来克服这种防御机带lJ[Homef,eta1．2000]。因此， 环境中有效铁的浓度会直接影响病原菌的生长和致病性。海洋水体庞大且呈微碱性，表层海水 中游离铁的浓度也比较低(为20 nM)，也属于缺铁环境。因此生活于海洋中的放线菌和 pM一1 病原弧菌都面临如何获得有效铁的问题。也许，产生铁载体正是海洋放线菌获得铁的有效途径 之一。有报道，铁营养竞争也是微生态制剂的对病原菌的控制机制之一。在鱼类养殖中发现将 著降低由致病弧菌引起的鱼死亡率[Gram，eta1．1999】。 本文，筛选了海洋放线菌的产铁载体活性，并通过共培养实验探讨了其在海洋放线菌抑菌 性中的作用。 1材料方法 1．1菌株海洋放线菌：由本实验室分离保存。弧菌：创伤弧菌(VibriovulnificusV0105)VV； P0207)VP；鳗弧菌(Vibrio 副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus anguillarum 弧菌(Vibrio AL0078)VAL；河流弧菌(Vibriofluvialis alginolyticus H)VH。以上菌株由中国水产科学院南海水产研究所馈赠。 harveyi 1．2培养基高氏一号固体培养基购于广东环凯微生物科技公司。黄豆粉液体培养基：(共培养 实验) 化钠，1．5％琼脂，自来水配制。 1．3产铁载体活性的筛选采用CAS法[Machuca，eta1．2003]。 1．4铁离子浓度对海洋放线菌抑菌性的影响 采用双层平板法，将海洋放线菌接种于含有不同铁离子浓度的高氏一号培养基平板，28C 培养4天。将TCBS固体培养基倾倒于其上，涂布哈维氏弧菌于284C培养24小时，观察并记 录抑菌圈直径。 +本研究在国家科技部863计划项目(2003AA624010)资助下完成。 4 LS90@ZSU．edu．cn 286 福建凌n 第三届海洋生物育技术论坛 2005．08．19·23 1．5共培养实验在黄豆粉液体培养基中接入一定量的弧菌，分装成两瓶，其中一瓶作为对照： 另一瓶接入一定量放线菌，逐日将培养液涂布于LBV平板上计数。 a1．2001]。 1．6铁载体定量分析采用高氯酸铁法[Shin，et 表1海洋放线菌抗菌谱 tO TableIThekindsofmicrobessensitive actinomycetes． 晤维氏弧菌H大肠杆菌枯草杆菌铜绿假单孢菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌新型隐球菌 AO： +-I-q-+ +++ q-q-+ ++ +q- 一 一 A02 +++++ +++ +++ ++ + 一