海湾扇贝Argopecten+irradians亲环素ACyclophilin+A基因的cDNA克隆及其表达特征研讨.pdfVIP

中国科协第四届优秀博士生学术年会论文集 海湾扇贝(Argopecten A)基因 的cDNA克隆及其表达特征研究 倪多娇1’2宋林生1常亚青3邱丽梅1赵建民1宋晓燕1 1．中国科学院海洋研究所实验海洋生物学开放实验室，青岛。266071 2．中国科学院研究生院， 北京，100039 3．大连水产学院，大连，116023 摘要亲环素A(cyclophilinA，CyPA)是亲环素家族重要成员，是重要的免疫抑制药物环孢 素A(CsA)的体内结合蛋白。亲环素(CyP)广泛存在于生物界且高度保守，具有肽基脯氨酰顺 反异构酶活性，CyP在蛋白质的折叠、装配与运输中发挥作用，也在免疫调节中发挥重要作 分析的结果显示它和其他动物CyPA基因相似性较高。海湾扇贝CyPA基因由1018个核苷酸 组成，开放阅读框为605个核苷酸，编码一条205个氨基酸的多肽。本研究使用实时定量 RT-PCR技术，对海湾扇贝CyPA基因的不同组织分布和两种细菌刺激后mRNA表达情况进 行了研究，结果表明海湾扇贝CyPA基因在被检测的组织中都有表达，其中，在血淋巴，肝 胰腺和外套膜中的表达量相对较高。在受到鳗弧菌和溶壁微球菌刺激后，海湾扇贝CyPA 基因表达量都呈上升趋势，在达到走高点后逐渐恢复到正常水平。实验结果表明，海湾扇贝 CyPA基因是一种诱导性表达的蛋白，并且在扇贝抵御外界微生物入侵的免疫防御过程中发 挥了作用． 关键词海洋生物； 亲环素； 非特异性免疫； mRNA表达 ，*．- 刚 百 A，CsA，)n】的高度亲合性。免 亲环素(cyclophilin，CyP)的发现与命名起源于它对环孢素(cyclospofin 疫抑制剂药物环孢素A是从真菌代谢产物中分离得到的含11个氨基酸的环状多肽【2】，临床上常用于治疗 器官移植后所产生的排斥反应及自身免疫系统疾病。亲环素是免疫抑制剂环孢酶素A在细胞内的作用靶 活性，催化蛋白质折叠过程，尤其是富含脯氨酸的蛋白质折叠，并且起着分子伴侣(chapemne)作用【3】。同 时参与相关的生物学过程如细胞凋亡和细胞间信号传导。CyPs能与CsA结合，阻断T细胞信号传递而实 现免疫抑制。 陆续从不同种属各种组织和器官中分离获得CyPA，成为环孢酶素A亲和素家族成员之一。依据相对分子 人亲环素A(hCypA)是最重要的，也足研究最广泛的成员。它由165个氨基酸组成，约占细胞蛋白总量的 它们的折叠、装配和转运，起分子伴侣的作用【5】。近年来，随着人们对CyPA研究的不断深入，对其生物 286 生物技术 Illl 40／热休克蛋白56(heat-shock56)复合物(胆固醇转运复合物)的形成，能激活内皮细胞，成为前炎 protein 性因子，还可作为一种氧化应激诱导分泌的生长因子【6】。 7．O～)。在不同组织和器官 CyPA具有主要和次要两种形式，等电点分别为碱性(pH8．0)和中性(pH rnRNA水 coli CyP～样。野生型E virus immunoddlciencytype 免疫抑制病毒导致的相关病理变化，与艾滋病的发病机理有关。从CyPA能有效治疗牛皮癣发现：人皮肤 和角化细胞中的CyP在细胞不同分化时期有不同表达【lo】。 随着人们对亲环素基因家族的认识，亲环素基因的生物学功能越来越被人们所重视。 探讨亲环素基 因在不同生物中的作用，尤其是在生物体内的免疫作用成为人们的重要课题之一。软体动物作为动物界物 种数量仅次于节肢动物