甘油脱氢酶.ppt

以生物柴油甘油为底物生产DHA的菌株的产量优化及甘油脱氢酶酶学性质研究 姓名：郑小娟 指导老师：刘宇鹏 1 实验背景及意义 2 实验内容及目标 3 实验创新点与难点 4 实验进程安排 5 实验前期进展 一、研究背景及意义 1.1 DHA概述 二羟基丙酮或1,3-二羟基丙酮,英文名为1,3-dihydroxyacetone ，简写为DHA，是最简单的三碳酮糖，外观是白色或类白色粉末状结晶,具有甜、凉的味道，易吸湿并分解。一般状态下是二聚体(1,4-Dioxane)的结晶。 DHA分子中含有3个官能团( 2个羟基、1个羰基)，化学性质活泼 。 1.2 DHA用途 化妆品领域 人工美黑、保湿、防晒和防紫外线辐射的作用。 医药领域 治疗白癫风、预防保护混合型卟啉病、DHA对氰化物中毒具有解毒效果、抑制寄生虫、抗鸡瘟病毒 化工领域 化学性质活泼，能参与聚合、缩合等化学反应，做为中间体在合成医药和农药方面具有重要作用。 食品领域 DHA被用作保健和功能性食品添加剂、风味添加剂、食品果蔬的保鲜剂等。 其他用途：瘦肉型饲料添加剂、皮革制品的保护剂。 DHA用途 B E C D A 用于二羟基丙酮衍生物的合成 用于保湿防晒化妆品 医用：用于治疗白斑、白癜风、抗鸡瘟病毒 促进猪瘦肉的增长 抗肥胖作用 1.3DHA生产方法 化学合法法 固定化法 发酵法 化学法生产效率低，成本高，环境污染严重，底物利用率低 固定化法包含固定化细胞和固定化酶，其优点是固定化细胞能重复使用，酶活力高，转化效率高，后期分离提取简单。但前期固定化繁琐。 发酵法具有可利用廉价原料直接生产DHA的优点，但是发酵生产周期长，工艺管理要求严格。 1.4用来生产二羟基丙酮的微生物资源 本实验室筛选菌种，Gluconobacter frateurii HD 924 保存于北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心, 保藏号CGMCC 5397 已授权中国发明专利，专利号：ZL 20118 1.5研究意义 随着石油价格高涨且波动频繁，从而引发石油危机. 燃料乙醇和生物柴油的出现在一定程度上缓解部分危机。在生物柴油生产的过程中，会产生大量含粗甘油的副产物，每生产10 kg的生物柴油，约得到1 kg的含甘油的副产物。 国内利用DHA 作为化工原料和医药中间体，后续开发的产品种类很多， 而且这些产品的市场容量也很大。目前国内对DHA 的需求量已超过1000 t/a，预计随着生产成本的降低， 其需求量将进一步扩大。 目前甘油的市场价格为4000～5000元/吨（医药食品级价格在8000~10000元/吨），二羟基丙酮市场价格为10~13万左右。而微生物法生产DHA转化率高达90%以上，因而采用生物法生产DHA利润巨大，具有极高的经济效益。 1.6 国内外研究现状 国外在上世纪七十年代已经形成成熟的生物法生产DHA产业。当前, DHA 的微生物发酵生产主要分布在美国、英国、德国和日本, 其中约 50%的 DHA 用于生产化妆品。日本大赛璐化学工业公司以甘油为原料采用发酵技术进行制备 DHA, 年产量达到 100 t。50%用于化妆品领域。 在国内，由浙江工业大学郑裕国教授开发的微生物发酵产DHA经过10年的发展现已在浙江海正药业股份有限公司完成 10 t 发酵罐规模的生产性试验。 本实验室与浙江长兴制药厂合作生产DHA项目已经完成第一阶段生产，目前正在进行年产1000 吨DHA扩产改造工作。 孙玲艳 等 2.10gL-1h-1 Hekmat等 2.80gL-1h-1 Ma等 2.29gL-1h-1 张小飞等 3.00gL-1h-1 产率分析 冯屏等 8.97 gL-1h-1 BACK 二、实验内容及目标 氧的传质速率Kla的提高对DHA产量的影响 DHA产量的提高 甘油脱氢酶在费托氏葡萄糖酸杆菌细胞内过量表达对二轻丙酮产量的影响 1氧的传质速率Kla的提高对DHA产量的影响 发酵液中的溶氧浓度对微生物的生长和产物形成有着重要的影响。研究溶氧对发酵的影响及控制对提高生产效率，改善产品质量等都有重要意义。氧的传质速率KLa是是发酵过程中溶解氧水平的重要参考水平。 控制KLa的途径可分为操作变量、反应液的理化性质和反应器的结构3个部分。操作变量包括温度、压力，通风量和转速(搅拌功率)等，发酵液的理化性质包括发酵液的黏度、表面张力、氧的溶解度、发酵液的组成成分、发酵