肿瘤相关巨噬细胞在结肠癌中的表达及与VEGF的相关性分析.docVIP

精品论文 参考文献 肿瘤相关巨噬细胞在结肠癌中的表达及与VEGF的相关性分析 1湖北省荆州市第五医院 434020 2华中科技大学同济医学院附属荆州医院 434020 【摘要】目的：观察结肠癌组织及癌旁组织中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）与VEGF的表达情况并探讨两者的相关性。方法：通过免疫组织化学方法检测结肠癌组织及癌旁组织中TAMs的特异性标志物CD68的表达以及VEGF的表达情况，比较TAMs和VEGF在结肠癌组织及癌旁组织的浸润强度并采用Spearman相关分析癌组织中两者平均IOD值的相关性。结果：TAMs在86例结肠癌中的表达阳性率为80.2%（69/86），其阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤的病理类型无统计学差异（Pgt;0.05），CD68的阳性率与肿瘤的分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移与否、肿瘤的侵润深度有关（Plt;0.05），CD68在癌肿组织阳性高于癌旁组织，两者之间的差异具有统计学意义，TAMs与VEGF在结肠癌中的表达呈正相关（r=0.619,Plt;0.05）。结论：TAMs在结肠癌中有明显的阳性表达，TAMs可能作为一个肿瘤治疗的新靶点，抑制肿瘤的生长。 【关键词】结肠癌；巨噬细胞；VEGF 【中图分类号】R735 【文献标识码】A 本研究通过免疫组织化学技术对结肠癌及癌旁组织中的TAMs的特异性抗原CD68以及血管内皮生长因子VEGF进行检测。并观察两者之间的相关性，从而探讨结肠癌浸润及转移的机制。 1资料与方法 1.1临床资料 收集2012年6月至2013年6月在我院胃肠外科行根治性结肠癌切除术患者86例，术后病理均为腺癌。所有患者术前均未行任何治疗。其中男性48例，女性38例，年龄28-83岁，平均年龄59.5岁。 1.2免疫组织化学染色 结肠癌组织及癌旁组织由4%的多聚甲醛固定，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，3.5mu;m切片。组织切片经烤片，二甲苯脱蜡，梯度酒精水化。枸橼酸钠盐高压热修复3分钟，后冷却至室温。3%过氧化氢室温孵育15分钟，山羊血清封闭非特异性抗原。CD68兔抗人单克隆抗体（abcam公司，1:150稀释），VEGF兔抗人抗体（中杉金桥公司，1:100稀释）4℃孵育过夜。生物素标记的二抗室温孵育15分钟。链霉素抗生物素蛋白室温孵育15分钟。显微镜下DAB显色，苏木素复染。脱水，封片。 1.3免疫组织化学染色结果分析 每张切片采集5个视野，采用图像分析软件（Image-pro plus 6.0）计算其单位面积平均光密度值(IOD) 1.4统计学方法 数据分析采用SPSS19.0完成。计数资料的比较采用卡方检验。Spearman相关分析对肿瘤组织中的CD68和VEGF的表达进行相关性分析。双侧检验P＜0.05表示有统计学意义。 2结果 2.1 CD68在结肠癌中的表达与患者的临床病理特征 86例接受根治性结肠癌手术患者的临床标本中，CD68的阳性表达者为69例（80.2%）。高中分化程度标本为49例，其中阳性表达者为43例，低分化者为37例，其中阳性表达者为26例，两者之间差异具有统计学意义（P=0.041）;有周围淋巴结转移者为52例，其中CD68表达阳性者为48例，无淋巴结转移者为34例，其中CD68阳性表达者占21例，两者之间差异具有统计学意义（P=0.001）；肿瘤侵及者为46例，其中CD68表达阳性者为41例，未侵及浆膜者为40例，其中CD68阳性表达者占28例，两者之间差异具有统计学意义（P=0.025）；肿瘤分期为Ⅰ+Ⅱ者为37例，其中CD68表达阳性者为25例，肿瘤分期为Ⅲ+Ⅳ为49例，其中CD68阳性表达者占44例，两者之间差异具有统计学意义（P=0.011）。CD68的表达情况与患者的性别、年龄、肿瘤的组织学类型未见明显相关。（表1） 2.2 CD68和VEGF在结肠癌组织及癌旁组织中的表达 CD68与VEGF在结肠癌组织中阳性表达均为棕黄色染色与细胞质内，结肠癌组织中两者的阳性表达明显高于癌旁组织。（图1，图2） 3讨论 TAMs在肿瘤组织中的侵润是一个复杂的过程，其依赖于肿瘤血管的生成，TAMs的前体单核细胞进入血液后与小静脉血管相互作用，粘附、聚集于血管内皮上，在相关细胞因子的作用之下，转化为TAMs。TAMs在肿瘤的生长过程中具有双重作用，一方面能够吞噬肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞的生长、浸润以及转移；另一方面，肿瘤组织中过量的M2型TAMs浸润能够刺激肿瘤新生血管的生成，促进肿瘤的生长。TAMs促肿瘤血管的生成的机