促减数分裂甾醇MAS对猪卵母细胞体外成熟和胚胎发育能力的影响研究.pdfVIP

中豳畜牧兽鼷学会动物繁殖学分会第十童届学术研讨会论文榘 !．．．．．IIIII II! I邕鼎冀皇量皇燃曼曼麓毫 促减数分裂甾醇(凇S)对猪卵母细胞体外成熟和胚胎 发育能力的影响 潘登科1万荣2刘害’牟玉莲1张莉’刘岚1．员薪旭’常杰1冯书堂” I孛莺农篷科学院素教研究巍墓霆譬缀蔻王程室，蔻衷，100094；2巾蓬表鼗大学魏物营养凝家重杰实验室，嚣塞， 100094 猪卵母细胞体外成熟质量的影响。将采尚猪卵巢表明直径3-5ram费泡的卵丘细胞包裹的努母细胞 (COCs，cumulusoocyte 00M、 h。培养结束薏，脱去努丘舞胞进静舔雌激活和；冀黯丸成绎维缎 20心、毒0瑟M)翡AY9944培养44 胞为核供钵重构胚黪，分剃于毒8h争144h跪察麟黯发育情况，统计辩裂率和裳胚率及囊胚／2一细 胞胚比率。本试验得到20州和40洲AY9944处理的卵母细胞囊胚率和2一细胞麟发弯到裳胚的比率 菠著增加，但毒密崩AY9944懋壤的舞母细胞成熬率显著下降，退纯舞藏著增多．藏时，以对照纽和 但有增加酹趋势。 关键词：猪；辩母细胞体外成熟；AY9944；囊聪发育率 现代繁殖生物搜术如体外受精、体缨胞壳隆及转基因技术豹残功实施需要～个充足豹舞母缀臌 的供应保障，这一需求不仅体现在数量上，更取决于卵母细胞的质量上。然而目前的状况不容乐观， 现有酶猪舞母缙臆体爹}墙赛俸系虽可供应大量豹舞母缨麓毽逡不及律内的震量。因茂建立～套蠡好 的培养体系来满足生产及磷究的需要就是得十分必簧，它将极大提高猪憝臆镩外生产效率。 sterols)是近年来被发现能促进卵母细胞体外减数分 促减数分裂甾醇(MAS，meiosis，activating 裂恢复的物蕨，登黄在小鬣、大鼠、兔、入及猪上进嚣了榛关翡磷究壤遴。MAS包括麸入卵泡滚提 琵甾醇14a脱甲基酶(CⅥ，51)催化羊毽鲻醇转化而来，而T小觚S则是在甾醇△14一还原酶(A 的累积。 现有的研究已诚实FF-MASW诱导猪卵母细胞体外减数分裂的恢复Ⅲ，但能否提高猪卵母细胞体 辩藏熟的麓康戒熟，霹蓠还未觅摄道。本试验剩翅MAS会戚筏谢过程孛酶抑制裁AY9爹氍累积 FF-MAS。阉接地研究了内源性FF-MAS对猪卵母缨熬体外成熟的质量影桷，虢箴熟舞母细胞孤雌激 活胚和克隆胚的囊胚发育率作为检测胞质成熟质量的指标。 1材料与方法 l。l试剂 细胞和胚齄舱培莽器腻均购l!IFalconBD公霹；羚嚣涨移FBS贿爨Gibco公弼；其它试裁除特殊注臻豁均 购flSigma公词。 基众项目：翻家科技攻关计划项目(2004BA717B) 佟赣篱奔；溱登辩(19了2～)，凳，臻士，助理磷究员，磋巍方囊麓猪转基露克隧灏胚骆手缎黢。 273 串耀畜牧营医学会动物繁殖学分会第十三属学术研讨会论文集 !II IIIII，_ 为添加10％(体积比)猪卵泡液(PFF)，0．57mmol／LL一半胱氨酸， 10ng／mL表皮生长因子(EGF)， 10 IU／mL人绒毛膜促性腺激素(hCG)和10 显微操作波为添加7．5批g／mL细胞松弛素B(cB)和4 无钙NCSU23：融合／激活泼由0．28mol／L甘露醇，0。lmmol／L氯化钙，0。1mmol／L氯化镁，0。5 mmol／LHEPES以及0．OI％BSA缎成；胚胎培养液为NCSU23+4BSA。 mg／mL vitro 1．2猪卵母细脆体外成熟(IVM，inmaturation) 从屠宰场取初情期前小母猪卵巢，放入28℃一35℃含青霉素和硫酸链霉素的生理盐水中，2h内 运回实验室。用配有18号针头的20mL注射器抽吸卵巢上3-6mm的卵泡， 经