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密级
学校代码 lQ5垒2 学号 2QQ墨!垒Q2QQ窆垒
灵芝三萜的提取及其对Q.鹅膏毒肽所致肝
损伤的保护作用研究
from
Extractionof Ganoderma
Triterpenoids
Effecton
Lucidumandit’SProtective
Q—amanitininducedLiver
Injury
研 究 生 姓名 周 鏊
指导教师姓名、职称 堕笠红塾撞
学 科 专 业 垫堑鲎
研 究 方 向 廛周真菌
湖南师范大学学位评定委员会办公室
二零一一年 四 月
摘 要
灵芝是著名的高等药用真菌,在亚洲主要分布于中国、朝鲜半
岛、日本等地,早在两千多年前灵芝就被我国人民所熟悉并采集使
用。研究表明,灵芝三萜是灵芝中主要活性成分之一。近年来有不
少文献报道,灵芝三萜类化合物具有很强的药理活性,如具有保肝、
抗肿瘤、抑制组胺释放等作用。而且目前临床上已经利用灵芝作为
一种主要的鹅膏中毒的治疗方法,但对其机理尚缺乏研究。本实验
用提取出来的灵芝三萜来治疗Q.鹅膏毒肽中毒的小鼠,从自由基和
抗氧化活性方面来探讨灵芝解毒的机理。
将灵芝子实体粉碎后,先经95%乙醇回流提取,再用氯仿萃取,
即得到中性提取物,然后经碱提酸化处理,再用氯仿萃取后,即得
到酸性提取物,经薄层层析,硅胶柱层析及高效液相色谱分析等手
段获得较纯的灵芝三萜。
对灵芝分离纯化各个阶段得到的组分及灵芝三萜进行药理实
验,通过设立小鼠鹅膏毒肽中毒组、中毒后灵芝活性成分灌胃组、
生理盐水对照组做比较,然后测定处理前后血清中丙氨酸转移酶
ALT、天冬氨酸转移酶AST,以及肝脏组织中的超氧化物歧化酶
SOD、过氧化氢酶CAT、丙二醛MDA,结果表明分离出的各个组
分,尤其是灵芝三萜,对由鹅膏肽类毒素所致肝损伤有保护作用。
在用Q.鹅膏毒肽处理小白鼠后,其ALT、AST、MDA都相对正常
对照组,有明显的升高,而当用灵芝各组分灌胃后,ALT、AST、
I
MDA均又有所降低,尤其是灵芝三萜高剂量(Fr.LZA高剂量)灌胃
组(200mg/kg),最接近正常对照组,其次是灵芝水提液灌胃组(Fr.W
灌胃组)、灵芝醇提液灌胃组(F.r.E灌胃组)。在用121.鹅膏毒肽处理小
白鼠后,其SOD、CAT都相对正常对照组,有明显的降低,而当用
灵芝各组分灌胃后,均又有所升高,尤其是灵芝三萜高剂量灌胃组
芝水提液灌胃组(Fr.W灌胃组)、灵芝醇提液灌胃组(Fr.E灌胃组)。
说明灵芝三萜对由鹅膏肽类毒素所致小鼠的这些酶活性的降低,有
明显的修复作用。因此,灵芝三萜对鹅膏毒肽所致肝损伤有一定的
保护作用。
通过观察比较正常对照组,Q.鹅膏毒肽中毒组,中毒后灵芝三
萜灌胃组的各小鼠肝细胞超微结构,结果表明,Q.鹅膏毒肽中毒组
与正常对照组比较有显著性差异,大的空泡化显而易见,细胞器受
到严重破坏。而灵芝三萜的干预则明显减轻了其破坏程度,而且可
见肝细胞再生现象,肝细胞超微结构接近正常对照组图。说明灵芝
三萜能修复由鹅膏毒肽中毒后小鼠肝细胞超微结构的破坏。因此,
灵芝三萜对鹅膏毒肽所致肝损伤有一定的保护作用。
关键词:灵芝,灵芝三萜,分离纯化,Q.鹅膏毒肽,肝损伤
Ⅱ
ABSTRACT
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