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实验1 微生物培养基的配制和灭菌
实验一 培养基的配制和灭菌 一、目的要求 了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。 学习并掌握高压蒸汽灭菌的原理和操作技术。 二、实验原理 由人工方法配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质称为培养基。 主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏或积累代谢产物等方面。 不同微生物的生长繁殖需要不同的环境、营养和酸碱条件,因此需要配制不同的培养基。 培养基的种类 从培养基的组成成分可分为: 1.合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。 2.半合成培养基:一部分纯化学物质和一部分天然物质配制而成。 3.天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成。 从培养基的物理状态可分为: 1.液体培养基:不加凝固剂。 2.固体培养基:加入2%左右的凝固剂。 3.半固体培养基:加入0.2—0.5%凝固剂。 从培养基的用途可分为: 1.选择培养基:加入目的菌特别需要的或抑制非目的菌生长的物质。 2.鉴别培养基:加入能够和目的菌的代谢产物发生可见反应的物质。 高压蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌法是微生物学实验、发酵工业、医疗保健以及食品检测中最常用的一种灭菌方法。 高压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的高压蒸汽灭菌锅中进行的,通过加热,产生大量蒸汽使其中压力升高,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。当蒸汽压达到1.055kg/cm2时,锅内温度可达到121℃,一般维持20min,即可杀死一切微生物的营养体或芽孢,而达到灭菌目的。 注意:高压蒸汽灭菌开始之前,要将锅内的冷空气排尽。 2、霉菌培养基(察氏培养基)300ml/组 配方: K2HPO4 0.1% MgSO4.7H2O 0.05% KCL 0.05% FeSO4 0.001% (加2滴即可) NaNO3 0.2% 蔗糖 3% 琼脂2.0% pH自然 配制: 计算----称量及溶化----定容----加琼脂 分装:各称取2%琼脂加入2个三角瓶中,再将培养基平均分装在2个三角瓶中,加塞,包扎。 3.PDA培养基 查阅实验教材,每小组可自愿配制300ml * *
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