生物选修三：专题一基因工程 1.1DNA重组技术的基本工具 课件 (共21张PPT).pptVIP

专题一 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 手术刀 缝合针 运输工具 问题探讨 来源 种类 作用 作用结果 阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶——分子手术刀”的相关内容，填写下表 主要从原核生物中分离纯化而来 已经分离出大约4000种 1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 2、使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成两种末端：黏性末端或平末端 1.限制性核酸内切酶——分子手术刀 * 限制酶的识别序列有何特点？ G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 SmaI只能识别CCCGGG序 列，并在C和G之间切开。 SmaI限制酶的切割 平末端　　　平末端 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？ 原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物 在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机 制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细 菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会 利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的 安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切 割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的 目的。 1.要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几刀？可产生几个黏性(平)末端？ 要切两刀，产生四个黏性(平)末端。 2.如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割，会怎样？ 会产生相同的黏性(平)末端 3.如果把具有相同黏性(平)末端的DNA连接起来，又会怎样呢？ 得到重组DNA * 类型 来源 功能 相同点 差别 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复磷 酸二酯 键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和 平末端(效率较低) 阅读课本第5页“分子缝合针”——DNA连接酶的相关内容，填写下表 2.DNA连接酶---分子缝合针 你能画出经DNA连接酶作用形成的磷酸二酯键吗？ E.coliDNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来 *