第九章 植物细胞培养.pptVIP

2、抑制法：使用DNA合成抑制剂，也可使细胞培养同步化。当细胞受到这些化学药物处理后，由于这些核苷酸类似物的存在阻止了DNA的合成，细胞周期只能进行到G1期，细胞都滞留在G1期和S期的边界，当把这些抑制剂除去后，细胞就进入同步分裂。 为了改善液体培养基中材料的通气状况，需进行培养基的不断振荡：（1）旋转培养（2）往返振荡培养（3）旋转振荡培养（4）搅动振荡培养 五、培养基的振荡 1、培养基成分：N6，MS，B5适合单子叶植物细胞，MS，B5，LS，SL适合双子叶植物细胞。条件培养基适合单细胞和低密度细胞培养。需要硝态氮、铵态氮、无机磷浓度更高。 六、影响细胞培养的因素 2、细胞密度：培养基的成分和起始细胞密度对单细胞培养成败有影响。 起始密度：细胞培养最低的有效密度，即能使细胞分裂、增殖的最低接种量，低于这个密度细胞不能分裂，甚至很快解体死亡。 3、植物生长调节剂：细胞悬浮培养时，常表现一种自然的聚集现象，加入2，4-D，少量水解酶或酵母提取液，能够增加细胞的分散度。 4、pH和二氧化碳浓度 在悬浮培养时，PH变动相当大。加入EDTA使铁和其他金属离子长期处于可利用状态。硝态氮和铵态氮之间进行调整可作为稳定PH的一种方法。 二氧化碳对细胞培养没有太大影响，但在低密度细胞培养中，二氧化碳对于诱导细胞分裂可能有重要作用。 第九章 植物细胞培养 第一节