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- 2018-01-18 发布于江苏
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第二章菌种选育与构建
筛选方法 ①加诱导酶合成抑制物 如:加邻硝基-β-D-岩藻糖苷,抑制-β半乳糖苷酶合成。 诱导型不能利用乳糖,不长;组成型产酶,能利用乳糖,生长,被富集。 ②交替培养法 含诱导物(乳糖)中培养——组成型快——不含诱导 物(葡萄糖)中培养——诱导型失酶——反复。 ③显色反应法 不含诱导物平板培养——加底物——分解(有颜色变 化)——检出。 4.抗(敏感)性突变株筛选 包括:抗生素、金属离子、温度、噬菌体 ①抗生素抗性突变:提高产量; ②抗噬菌体突变:消除噬菌体污染; (与噬菌体存在与否无关) ③条件抗性突变:如温度,可提高产量; (温度敏感突变,高温呈营养缺陷表型) ④物敏突变: 如:氟乙酸抑制顺乌头酸酶,氟乙酸敏感突变型, 顺乌头酸酶活性极低,更敏感,异柠檬酸产量 少,柠檬酸积累。 三、杂交育种 长期诱变会使菌种生活能力下降。 借助有性重组,使不同菌株的遗传物质 得以交换(获优良性状集中的重组体)。 1.细菌的杂交育种 方法:转化、转导、F因子转导、R因子转移、接 合。获部分合子。 出发菌株需带遗传标记:营养缺陷、抗生素抗性、 温敏、发酵性能 2、放线菌的杂交育种
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