热打击对体外培养人血管内皮细胞骨架及细胞周期的影响.PDFVIP

中华危重病急救医学 2015 年8 月第27 卷第8 期　Chin Crit Care Med，August 2015 ，Vol.27，No.8 · 639 · · 论著· 热打击对体外培养人血管内皮细胞骨架 及细胞周期的影响 【摘要】 目的 探讨热打击对体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC ）细胞骨架及细胞周期的影响。 方法 体外培养HUVEC ，并分别置于37 ℃、 5%CO2 培养箱（对照组）或43 ℃细胞培养箱（热打击组）培养 1 h。采用考马斯亮蓝R-250 染色法，高倍镜下观察热打击对HUVEC 细胞骨架的影响。热打击组细胞培养1 h 后继续置于37 ℃、 5%CO2 培养箱孵育，分别于0 、 6 、 12 、 18 、 24 h 采用流式细胞仪检测热打击对HUVEC 细胞周 期的影响。结果 镜下观察对照组HUVEC 细胞骨架形态正常；热打击组随热打击时间的延长，细胞骨架逐渐 增粗、变短，且出现明显的应力纤维。对照组细胞G0/G1 期DNA 含量为48.57% ，S 期为44.62% ，G2/M 期为6.81%。 在热打击后HUVEC 细胞各时间点G0/G1 期DNA 含量为38.07% ～55.19% ，热打击后0 、 6 、 12 、 18 、 24 h 组分别为54.06%、 55.19% 、 48.23% 、 38.07% 和41.03% ；S 期DNA 含量为35.33% ～48.18% ，热打击后0、 6 、 12 、 18、 24 h 组分别为35.33%、 39.50% 、 42.50% 、 48.18% 和47.99% ；G2/M 期DNA 含量为5.31% ～13.75%，热打 击后0 、 6 、 12 、 18 、 24 h 组分别为 10.61%、 5.31% 、 9.27% 、 13.75% 和10.98%。说明当HUVEC 细胞离开热打 击环境后，G0/G1 期DNA 含量在6 h 内明显高于对照组，至12 h 时才恢复至对照组水平。结论 热打击可改 变HUVEC 细胞骨架结构，且细胞周期出现阻滞，细胞被阻滞在G0/G1 期。 【关键词】 热打击； 血管内皮细胞； 通透性； 细胞骨架； 细胞周期 The effect of heat stress on the cytoskeleton and cell cycle of human umbilical vein endothelial cell in vitro Pan Zhiguo*, Shao Yu, Geng Yan, Chen Jinghe, Su Lei. * Department of Critical Care Medicine, Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command, the Military Key Laboratory of Trauma Care in Hot Zone and Tissue Repair in PLA, Guangzhou 510010, Guangdong, China Corresponding author: Su Lei, Email: slei_icu@163.com 【Abstract 】 Objective　To study the effect of heat stress on the cytoskeleton and cell cycle of human umbilical vein endothelial cell ( HUVEC ) in vitro. Methods HUVEC was cultured in vitro in 5%CO medium at 37 ℃ ( control