生化课件RNA的生物合成.ppt

帽结构 帽结构的生成过程 帽结构的意义： 可以使mRNA免遭核酸酶的攻击； 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 （二）前体mRNA在3?-端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 前体mRNA分子的断裂和加多聚腺苷酸尾是多步骤过程。 （二）前体mRNA在3?-端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 （并接体, splicesome） snRNA （三）前体mRNA的剪接主要是去除内含子 在细胞核内出现的初级转录物的分子量往往比在胞质内出现的成熟mRNA大几倍，甚至数十倍。核酸序列分析证明，mRNA来自hnRNA，而hnRNA和DNA模板链可以完全配对 去除初级转录物上的内含子，把外显子连接为成熟RNA的过程称为mRNA剪接（mRNA splicing）。 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子：隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 3. 剪接过程需两次转酯反应 4. 剪接体是内含子剪接场所 5. 前体mRNA分子有剪切和剪接两种模式 前体mRNA分子的加工除上述剪接外，还有一种剪切（cleavage）模式。 剪切指的是剪去某些内含子后，在上游的外显子3?-端直接进行多聚腺苷酸化，不进行相邻外显子之间的连接反应。 剪接是指剪切后又将相邻的外显子片段连接起来，然后进行多聚腺苷酸化。 6. 前体mRNA分子可发生可变剪接 许多前体mRNA分子经过加工只产生一种成熟的mRNA，翻译成相应的一种多肽；有些则可剪切或（和）剪接加工成结构有所不同的mRNA，这一现象称为可变剪接（alternative splicing），又称选择性剪接。 真核细胞基因的前体mRNA交替加工的两种机制 有些基因的蛋白质产物的氨基酸序列与基因的初级转录物序列并不完全对应，mRNA上的一些序列在转录后发生了改变，称为RNA编辑（RNA editing）。 RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 （四）mRNA编辑是对基因的编码序列进行转录后加工 APOB基因的mRNA在肝和肠黏膜编码不同多肽链 二、真核rRNA前体经过剪接形成不同类别的rRNA 转录 45S - rRNA 剪切 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 真核前体rRNA转录后的剪切 三、真核生物前体tRNA的加工包括核苷酸的碱基修饰 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 依赖?因子的转录终止 非依赖?因子的转录终止 四、原核生物转录终止分为依赖?因子与非依赖?因子两大类 转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为： ?因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ?因子能结合RNA，又以对poly C的结合力最强，但对poly dC/dG组成的DNA的结合能力就低得多。 ?因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(he