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维普资讯 讲 学屯 辍 第加卷 第 l0期 CHINESESCIENCEBULLETIN 1995年 5月 纳秒激光激发的紫膜 K，L过程寿命的测量 7 陈志坚 姚德成 中‘国科学 再瑶院物理教学部，北京I~OBg} 胡坤生 施 桦 (中国科学院生物物理研究所，北京 100101) K过径，L辽径 关键词 塑生荸孽纳秒 G_光 紫膜是嗜盐菌在特定条件下在其部分细胞膜上合成的，膜上仅有一种蛋 白质—— 菌紫质 (BR)，它 由248残基组成 ，分子量为 26ku，7次跨膜 ．在光照下，BR分子会经过一系列物化 变化形成一系列 中间体K，L，M，N，o，最后又恢复至原始状态 ．紫膜是理想的生物光能 转换材料，并成为多种学科的研究对象，由于紫膜的光循环过程与质子泵功能以及光 电响应相 关联，BR的光化学循环过程的测定和研究在紫膜及其应用中有重要的作用 ．光动力学过程 的参数是一个主要的物理参数 ．国外文献 中有 关报道不少 ，国内在毫秒级的动力学过程的 测量 已有成熟的装置和应用 ．但仅能测量 M 中间体以后的衰减过程，为了研究 M 以前的 K，L等动力学过程，必须用纳秒激光分析研究微秒量级 的过程 ，我们采用 7m 的激光作为 激发光源，同时测量到K，L等中间产物的形成和衰减过程，这对利用K过程研究BR双稳态和 深入了解紫膜的光动力学过程都有重要作用 ． 1 材料与方法 嗜盐菌 (RM。)的培养及紫膜的分离，按Oesterhelt方法进行 ．分离得到的紫膜碎片悬浮于 重蒸水 中，吸收光谱的测量表明，其最大．吸收峰 (可见部分)为570I】m，紫外吸收最大值 (278nin)与 570r舡l吸收的比值小于 2，说 明纯度好 ．悬浮液在实验前保存于冰箱 中 区亘 卜 ] (4℃)备用．图 1是实验装置 图．触发 BR 产生光循环 的570m 激发光是 由调 O 的 Nb：YAG泵浦的染料激光器获得 的．激光 脉冲宽度小于 10ns，重复频 率 为每秘 l0 次，能量约为 0．7mJ．样 品是装在 比色杯 (底面积为 10mill×10mm)中的紫膜水悬 浮液 ．用一焦距 12cm 的柱透镜将激发光 图 1 实验装置方框图 会聚到 比色杯 中，峰值 功率 为 lO 0． 1994—03,-19收蔫．1994—12-05收修改稿 维普资讯 科 学 通 报 第 4o卷 用 6mW 氦氖激光 (波长 632．8m )作为测量光，为避免杂散光的干扰，测量光先进单色仪再 到光电倍增管，所用光 电倍增管为 1P28，其时间分辨约为 2ns．光电流信号经一宽带放大器放 大后，输入至瞬态记录仪，联用的计算机可将数据累加存储 ．瞬态记录仪 以AC耦合方式输 入，其低频截止为 1．6Hz，采样的时间间隔可 以选择，最短为 10ns，采样个数最多可达 16o0O， 为提高信噪比，把采样次数提高到 1o0O次，最后得到的是累加的吸收随时间变化过程 ． 实验是测量紫膜对测量光吸收变化的时间过程，在研究毫秒级动力学过程时，文献[5】报道 测量光一般采用稳流的白炽灯经单色化后的光源，但在观测毫微秒 时间过程时，其分光后亮 度太低，光 电倍增管探测输出会有严重的量子起伏 ．因此我们选用氦氖激光作 为测量光，一 方面提高光源亮度，另一方面由于测量光波长避开了光循环中间产物 K，L，M 的最大吸收 峰，因而在 1次测量中，所有产物的吸收过程都