信息菌素 — 一种新型蛋白类抗生素课件.pptVIP

谢 谢 信 息 菌 素 — 一种新型蛋白类抗生素 现用抗生素问世 70 余年来，拯救了无数生命，有效的延长了人类的平均寿命。 然而，由于现用抗生素多是真菌和放线菌的次级代谢产物，杀菌方式多系抑制或 阻断细菌的某种生化代谢途径中的一步，细菌很容易经过基因突变的方式来改变 被抗生素阻断的步骤，从而使抗生素失效，甚至干脆用酶将抗生素失活。 经过 70 余年的应用，现用抗生素已经“杀灭”了大部分“易感”菌株，而存活 下来的都是“耐药”菌株，因此现用抗生素将很快对细菌失去作用。 我们迫在眉睫的任务，是赶快寻找抗菌机制和作用与现用抗生素完全不同的新型 抗生物质。 自然界存在着很多种抗菌体系，其中研究的较为透彻的抗菌体系，是细菌素。 已知大约 90% 的细菌分泌细菌素。细菌素是一类蛋白质，它们的生物活性是 杀灭同种异株的细菌，从而让分泌细菌素的菌株繁衍下去。 细菌素的典型代表，是大肠杆菌分泌的大肠菌素 (Colicin)。现在已知的大肠菌 素有 20 余种。 其中 E1 族大肠菌素的作用机制, 是在靶细菌膜上形成一个致死性离子通道，让 细菌内容物在数分钟内泄露，造成细菌衰竭、死亡。这是一种与现用抗生素工 作机制完全不同的物理工作机制。（物理互动过程） 这个杀菌机制已经成功的工作了十数亿年。 大肠菌素（colicin）是大肠杆菌（Escherichia. coli）分泌的一类细菌素（bacteriocin），对于其他不能分泌特异性大肠杆菌素免疫蛋白（Immunity protein）的近缘细菌具有杀灭作用，在一般认为有调节菌群数量的作用。 大部分大肠杆菌素是大小在50-90 kD的蛋白质，它由三个不同的结构域（T、R、C）组成。它们是由质粒编码的蛋白质，其中最著名的莫过于pColE1。 Weiner et al, Nature, 385, 461-464 (1997) Colicin Ia（626aa） Typical model of bacteriocin is colicin Colicins are one of the modulation dynamics for maintaining the biodiversity and evolution of enteric microbiota. N-terminal C-terminal Translocation domain Receptor domain Channel-forming domain 根据大肠菌素的作用机制，大肠菌素可被分为离子通道型（ionophoric） 和酶活性（enzymatic） 两种。 根据其通过细菌内膜方式，大肠菌素可被分为Tol系统依赖型和Ton系统依赖型。Tol系统依赖型的大肠杆菌素的活性不依赖膜电势（最常见的是pmf， proton motive force 氢离子动力势）；而Ton系统依赖型大肠杆菌素的活性则依赖膜电势，用CCCP(carbonyl cyanure-m-chlorophenyl hydrazone) 一类去H+离子梯度剂处理过的细胞，细胞表现出对Ton系统依赖型大肠菌素的抗性。 早在得到诺贝尔奖的第二年（1946），青霉素的发明人 Florey 和 Heatley就发现 大肠菌素的杀菌效力较青霉素强大数千倍，可在体内工作，安全，对肠道菌群无 毒性。 但是，他们发现大肠菌素的抗菌谱太过狭窄，只能识别和攻击大肠杆菌。因此， 他们悲观的结论，大肠菌素不具备开发成为抗生素的潜质。 我们的《微生物学》教科书上，也是这么定义的。 这么一来，70 余年过去了。 那么，大肠菌素能否开发成为一种新型抗生素呢？ 关键，在于设法拓展大肠菌素的抗菌谱。也就是说，给野生型大肠菌素连接一个 新的配体，让它带着大肠菌素去识别病原菌。 药物的一个重要功能，是具有靶向性 自然界已经有了一个现成的靶向识别成品库 — 抗体 抗体都很类似，因为都是一样的基本结构 抗体又各不一样，因为可变区不一样，而恰好是可变区的不一样，使每个 抗体的靶向性不一样 我只打算利用抗体多变的靶向性，其它功能可以不要 我不需要天然抗体的六个抗原结合区， 我只应用两个抗原结合区来构建我的抗体模拟物 无论从空间构型、还是从一级结构角度来解析，这是一个源于自然，却又高于 自然的创新发明 抗体结构： 2条轻链（L，分为κ或λ型），2条重链（H，分别用希腊字母α、δ、ε、γ和 μ 来命名） 轻链大约为 214 个氨基酸，包括一个恒定区（C）和一个可变区（V） 重链长度大约450个氨基酸（μ和ε为550）， 包括三个恒定区和一个可变区，