小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究-生物通.PDFVIP

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小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究-生物通

遗 传 学 报, (): , ? F #!2 d #!F %% !#$ %’#($ )(’($ 小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究 骆 蒙,孔秀英,刘 越,周荣华,贾继增! (中国农业科学院品种资源研究所 农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室,北京 !#!) 摘要:以抗白粉病品系“百农 ” 为材料,构建了白粉病菌诱导的普通 文库和抑制消减杂交 $%! ’ ()*+,-* ./ 1 3456 0 2 ( ) 文库。分别对两文库进行了一定规模的测序,获得普通 文库不重复 条和 文 778 3456 3456 97:; $# 778 3456 库 条。将获得的 与 序列进行了 、 同源性分析。结果表明:在普通文库中,一 97:; 97:; =-.)? .@67: .@67:A 些参与光合作用与核糖体构成等的基因出现频率较高,而获得的抗病相关基因则较少。消减文库在构建方法、抗 病相关基因的富集等方面具有明显的优越性,是目前抗病基因表达谱研究中的较好方法。利用高密度点阵膜杂交 技术对两文库的筛选结果表明,该方法具有相对简便易操作、杂交膜可反复使用等优点;但也存在BC56 及同位素 用量大等问题。经筛选,消减文库中有02 D ! 髎的功能已知97:; 为抗病相关基因,被证明参与了小麦抗白粉病反 应。 关键词:小麦;白粉病;基因表达谱; 文库;杂交筛选 3456 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) E2F0 G # 6 $F H 2!% %% F H #!2 H !#$ %’()(*+ ,-.+/(0!/-. ).1 2!(**..3 . 4*.* 567(*++-. 8(-9:.3 -9 +*)+* ;*++/).!* . =*)/ ! , , , , @IJ (-K LJ5= MNOPQNK @RI QO- S8JI CTKP8O) UR6 UNPS-K ( , , !# $% ’( )*’+ ,*-+$%.- / 01’2345’$’6# 7151.2*# ’( 86*139$29* , , , )

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