高效液相色谱法测定兔眼房水中维生素A棕榈酸酯的含量-中国药师.PDFVIP

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　研究报告　 ｗｗｗ．ｚｇｙｓ．ｏｒｇ 高效液相色谱法测定兔眼房水中维生素Ａ棕榈酸酯的含量 １ ２ 何文 　毛妮娜 　（１．武汉大学人民医院药学部　武汉４３００６０；２．武汉大学药学院） 摘　要　目的：比较不同萃取剂及提取方式对房水中维生素Ａ棕榈酸酯（ＶＡＰ）提取率的影响，并用ＨＰＬＣ法测定兔眼房水中 ＶＡＰ浓度，提供其药动学实验基础。方法：分别比较二氯甲烷、氯仿、正己烷及乙醚萃取兔房水中ＶＡＰ的提取率及不同处理 提取方式对提取率的影响。以甲醇沉淀兔眼房水中的蛋白质后进行ＨＰＬＣ测定，流动相为甲醇，检测波长为３２７ｎｍ，流速ｌｍｌ －１ ·ｍｉｎ ，柱温３５℃。结果：二氯甲烷、氯仿萃取法对ＶＡＰ提取率较低；而乙醚与标准应用液及房水互溶达不到萃取目的；正己 －１ 烷萃取法制备的房水样品ＶＡＰ提取率较高。兔眼房水中ＶＡＰ浓度在０．０４７～４．０８０ ｇ·ｍｌ 范围内呈良好的线性关系，方法 μ 学回收率９９．０％，绝对回收率９６．１％，日内和日间ＲＳＤ小于１０％。结论：本方法具有灵敏、准确、快速等特点，可应用于眼房 水ＶＡＰ的药动学研究。 关键词　维生素Ａ棕榈酸酯；眼房水；ＨＰＬＣ；萃取剂；提取方式 中图分类号：Ｒ９６９．１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１２）０２０２１４０４ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＶｉｔａｍｉｎＡＰａｌｍｉｔａｔｅｉｎＡｑｕｅｏｕｓＨｕｍｏｒｏｆＲａｂｂｉｔＥｙｅｓｂｙＨＰＬＣ １ ２ ＨｅＷｅｎ，ＭａｏＮｉｎａ（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＲｅｎｍｉｎＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００６０，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒ ｍａｃｅｕｔｉｃｓＳｃｉｅｎｃｅ，ＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔａｎｔｓａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｖｉｔａｍｉｎＡｐａｌｍｉ ｔａｔｅ（ＶＡＰ）ｉｎａｑｕｅｏｕｓｈｕｍｏｒｏｆｒａｂｂｉｔｅｙｅｓｂｙＨＰＬＣｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｂａｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅＶＡＰｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｄｉ ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ，ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ，ｎｈｅｘａｎｅａｎｄｅｔｈｅｒ，ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＶＡＰｉｎｒａｂｂｉｔａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣａｆｔｅｒｐｒｏｔｅｉｎｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｗｉｔｈｍｅｔｈａｎｏｌ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｏｆ －１ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ３２７ｎｍ，ｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１ｍｌ·ｍｉｎ ａｎｄｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ３５℃．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅＶＡＰｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅｏｆｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅａｎｄｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｗａｓｂｏｔｈｌｏｗ，ａｎｄｅｔｈｅｒｃｏｕｌｄｄｉｓｓｏｌｖｅｉｎｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄａｐｐｌｙｉｎｇｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄａｑｕｅｏｕｓｈｕｍｏｒｒｅ ｓｕｌｔｉｎｇｉｎｉｎｖａｌｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅＶＡＰｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｎｈｅｘａｎｅｗａｓｐｒｏｍｉｓｉｎｇ．ＴｈｅＶＡＰｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｉｎｒａｂｂｉｔａｑｕｅｏｕｓｈｕ －１ ｍｏｒｗａｓ０．０４７４．０８０ ｇ·ｍｌ ｓｈｏｗｉｎｇａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ９９．０％，ａｂｓｏｌｕｔｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ μ ９６．１％，ｉｎｔｒａ