植物组织培养第八章PPT.pptVIP

第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.1 大量细胞培养 2.1.2 植物细胞的固相化培养 （2）植物细胞的几种固相化方法 ①褐藻酸和藻酸盐； ②甲叉藻聚糖 、琼脂糖 ； ③琼脂 ； ④Kappa-carragenan 第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.1 大量细胞培养 （3）固相化植物细胞成活力测验 ①成活力染色：荧光素二醋酸(FDA) ②质壁分离 ③呼吸作用 ：把小球悬浮在培养液中，测定培养时间与耗氧量关系 ④细胞生长：以相对干重表示 ⑤细胞分裂 ：有丝分裂指数 ⑥32p核磁共振(NMR) 第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.2 植物单细胞培养 通过单细胞的克隆化，可以把微生物遗传 学技术用于高等植物的改良。 2.2.1 单细胞的分离 单 细 胞 的 分 离 植物器官分离单细胞 培养组织分离单细胞 机械法 化学方法 酶解法 愈伤组织振荡、过滤、离心 第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.2 植物单细胞培养 2.2.2 单细胞培养系统 单 细 胞 培 养 固体培养 看护培养 液体培养 微室培养法 平板培养 条件培养 微滴培养法 液体浅层培养法 第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.2 植物单细胞培养 2.2.2 单细胞培养系统 条件培养 在选用的培养基中，加入一定量已生长过组织或 细胞的培养液(离心除去组织或细胞)，称条件培养 液；用条件培养液培养细胞，即使接种的细胞密度 低于最低的有效密度，这些细胞也能生长和分裂。 这种不同种植物、不同种类组织可以相互诱导细胞 分裂的事实，被认为不同种植物细胞，在开始分裂 时所需的内源代谢产物可能是相同的。 第8章 植物细胞培养2 细胞培养的方法 2.2 植物单细胞培养 建立细胞株 高产细胞株选择 分化或扩大培养 鉴定和提取 单 细 胞 培 养 的 程 序 选好材料（外植体或愈伤组织）；悬浮细胞液制备 （振荡、过滤、离心）；起始密度控制 细胞株（来自一个细胞）；次生物质合成能力的 鉴定和测定 依据培养目的和鉴定结果，进行分化或增殖培养 对分化的再生植株进行产量、品质及抗性鉴定 和遗传分析 园林学习网 园林学习网 园林学习网 园林学习网 第8章 植物细胞培养 学习目的与要求 学习重点与难点 本章主要内容 1 植物细胞培养概述 2 植物细胞培养的方法 3 植物细胞培养的影响因子 第8章 植物细胞培养 学习目的与要求 掌握植物细胞培养的影响因子与培养方法；掌握细胞悬浮培养、单细胞培养；了解固相化培养。 第8章 植物细胞培养 学习重点与难点 重点：植物细胞培养概述、植物细胞悬浮培养、植物单细胞培养、植物细胞培养的应用 难点：植物细胞培养的应用。 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.1 概念 1.2 基本培养技术 1.3 细胞培养的特点 1.4 植物细胞培养反应器 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.1 概念 植物细胞培养是指以单细胞或细胞团为单 位进行的植物组织培养方式。 细胞培养操作简单、试验重复性好、单次试验群体大等特点，所以越来越受到人们重视。 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.2基本培养技术 （3）植物细胞培养方法 细 胞 培 养 大量细胞培养 单细胞培养 悬浮培养 固相化培养 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.3细胞培养特点 (1)植物细胞的特点 ①植物细胞培养时生长速度较慢。 ②植物的培养细胞直径为20-150μm ，比细菌大30-100倍。 ③培养的植物细胞的纤维素细胞壁是非常脆弱的，难以承受反应器中搅拌器产生的巨大切割力。 ④植物细胞的生理和代谢活性较低，次生物质的合成和累积速度也较低。 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.3细胞培养特点 ⑤植物细胞需要较复杂的培养基。 ⑥植物细胞系不像微生物那样易于保存。 ⑦许多次生物质的合成与累积和细胞分化过程有关。 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.3细胞培养特点 （2） 细胞培养液的性质 植物细胞培养液的黏度，随细胞浓度的增加而 显著上升。 （3）植物细胞培养中的传递状态 为了供给必要的氧，必须进行通气和搅拌；与 微生物深层培养相比，植物培养细胞的需氧量要 低得多。 第8章 植物细胞培养1 植物细胞培养概述 1.3细胞培养特点