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双层滤板膜堆在单抗工艺上的大规模澄清过滤应用评估
BioprocessTM
INTERNATIONAL
双层滤板膜堆在单抗工艺上的大规模澄清过滤应用评估
Purav Dave, Jemelle Dizon-Maspat, 和 Tony Cano
转载经过 BioProcess International 7(6)(2009 年 6 月) 许可
通常,大规模抗体生产的第 颗粒穿透。此外,当过滤速度达
一步是在培养周期结束时收获 到剪切力域值时,深层过滤器也
中国仓鼠卵巢细胞(CHO )培养 可能丧失吸附能力(例如膜孔逐
液(CFF )。即分离分泌表达的抗 渐堵塞和收缩),此时剪切力能
体和细胞碎片。通常采用用切向 够冲走结合的颗粒(3 )。因此吸
流过滤(TFF )系统或组合采用 附能力的强弱对于深层滤器下
离心和深层过滤进行培养液的 游的过滤器非常重要,因为它们
澄清处理(1,2)。 会经历因深层过滤器吸附饱和
本文所讨论的 CCF 澄清工 突发性的滤出液颗粒增多和污
艺,包含碟片式离心机,两级深 染。表现在澄清过滤工艺上,就
层过滤,和 0.2 μm 除菌级过滤三 是容污能力较低的除菌过滤器
个步骤。图 1 显示了典型的离心 过滤能力快速丧失。因此,在小
收获流程。深层滤板从离心液上 规模试验期间监测深层过滤器
清进一步去除细胞碎片和可能 和下游过滤器两者的压力十分 器。在线性小试研究中我们也使
的细胞残留物,从而防止下游除 重要,因为两种过滤失效模式 用表 1 中各型号的小型囊式过滤
菌级过滤器堵塞。在该工艺放大 (压力增加和颗粒穿透)可以独 器。
到新生产车间前,我们进行了小 立发生。
规模研究以评估若干单级深层
过滤器是否能与车间现有工艺 材料和方法
设备配套。 我们公司现有的深层过滤工艺
深层过滤采用两种机制去除颗 包括松散精度深层过滤和能够
粒(3 )。首先是拦截,颗粒由于 保护终端除菌过滤器的致密精
自身的物理尺寸在过滤器内被 度深层过滤。所有的深层过滤器
截留。它们可能被困在过滤器表 介质都呈圆盘状,置于 316L 不
面,因此根本没有进入基质,或 锈钢滤壳中。表 1 列出了我们在
在通过深层过滤基质的曲径时 大规模生产中使用的公称精度
被俘获(筛选)(4 )。颗粒拦截 单层滤板深层过滤器。表 2 列出
伴随过滤器压差增高,因为它的 了我们在线性小规模研究中使
基质被不断累积的颗粒堵塞。第 用 的 双 层 滤 板 深 层 过 滤
二种机制是吸附,比过滤器拦截
精度更小的颗粒能够从流体中
被吸附去除(2,5 )。这种机制是
通过深层过滤基质上的净电荷
实现的。
如果一个深层滤器缺乏吸附能
力或当深层滤器因耗尽吸附能
力而达到饱和时都可能会导致
发酵罐
图 1 典型的两步(左)和一步(右)澄清工艺流程图
二级 单级
松散
级深 双
发酵罐
层过 层
滤 深
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