野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用.docVIP

精品论文 参考文献 野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用 邵阳市中医医院 湖南邵阳 422000 摘要：目的：探讨野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制效果。方法：本研究采用CCK－8法及 Annexin－V/PI双染色法分别测定对照组中野菊花总黄酮和研究组中野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制效果，并对两组的抑制作用进行分析比较。结果：野菊花总黄酮联合顺铂组细胞抑制率为（43.49plusmn;2.82）%，凋亡率为（51.93plusmn;1.92）%，野菊花总黄酮组细胞抑制率为（25.91plusmn;2.48）%，凋亡率为（36.36plusmn;1.85）%，结果表明，研究组细胞抑制率及凋亡率均显著高于对照组，差异比较具有统计学意义（Plt;0.05）。结论：野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制效果显著，并能促进其凋亡，值得进一步研究，在临床上推广及应用。 关键词：野菊花；野菊花总黄酮；顺铂；人骨肉瘤；MG-63细胞；抑制作用 骨肉瘤是临床上常见的恶性骨肿瘤，发病人群主要集中在青少年，发展于间质细胞系，肿瘤通过软骨期形成肿瘤骨样组织，造成肿瘤生长迅速[1]。临床上一般应用西药治疗，但是用药过多会出现耐药性，降低疗效。西药结合中药是一种新模式，用一种无毒的具有增敏作用中药成分与化疗药物结合使用，在保证化疗药物杀灭肿瘤细胞效果的同时降低化疗药物的使用剂量，进一步降低化疗药物所带来的不良反应。近几年来，部分学者针对如何抑制人骨肉瘤MG-63细胞做了大量的研究探索，发现比较有效的成分有野菊花总黄酮，能够显著地抑制人骨肉瘤这种恶性肿瘤[2]。本研究，探讨了野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制效果，现总结报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 人骨肉瘤MG-63细胞来自中国医学科学院基础医学研究所，DMSO溶解野菊花总黄酮（本实验室库存）后制成400mg /mL母液[3]，顺铂注射液选自江苏豪森药业，血清选自PAA公司，CCK－8细胞增殖检测试剂盒购自日本同仁化学研究所，细胞凋亡检测试剂盒购自北京宝赛生物技术公司，研究组和对照组各配制30组实验测定液。 1.2 实验方法 1.2.1 CCK－8法测定细胞生长抑制率 将处于对数生长期的MG－63细胞接种于96孔细胞培养板上，密度为4times;103个/孔，每孔体积100 ul。细胞培养1天后，每孔加20ul CCK－8试剂，避光反应2 h，采用酶联免疫检测仪测定每个孔的吸光度，波长为490 nm，重复3次实验结果取平均值。 1.2.2 Annexin－V/PI双染色法测定细胞凋亡 细胞种板同细胞生长抑制率测定相同，加药物培养1天，胰酶消化终止培养，PBS洗3次，避光，每孔加入5 ul PI染液，在室温下反应半个小时，利用流式细胞仪检测细胞凋亡率，重复3次实验结果取平均值。 1．3统计学处理 数据均通过SPSS19.0软件处理，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验，当Plt;0.05时表示数据间比较差异具有统计学意义。 2 结果 2．1 两组细胞抑制效果的比较 野菊花总黄酮联合顺铂组细胞抑制率为（43.49plusmn;2.82）%，凋亡率为（51.93plusmn;1.92）%；野菊花总黄酮组细胞抑制率为（25.91plusmn;2.48）%，凋亡率为（36.36plusmn;1.85）%，研究组细胞抑制率及凋亡率均显著高于对照组，差异比较具有统计学意义。具体数据见表1。 3 讨论 人骨肉瘤是导致青少年恶性肿瘤死亡率居高不下的主要原因[4]，人骨肉瘤患者5年生存率只有50%多，由于其局部湿润严重，早期容易转移，一旦转移后生存率降到20%多。目前除了手术之外最常用的治疗方式是术后化疗，不过目前的一些化疗方案，往往会带来很多严重的不良反应，如过敏反应、骨髓抑制、损伤肝肾等，虽然化疗能够使肿瘤细胞生长得到控制，但是上述这些副反应会加重患者身体与心理上的痛苦，使生活质量大大降低，甚至被迫终止治疗，寻找高效安全的治疗药物显得尤为重要。 顺铂属于抗肿瘤药物，在肿瘤细胞的M期发挥作用，是一种细胞周期的特异性药物[5]。临床上主要治疗肺癌、骨肉瘤等恶性肿瘤，疗效显著。其作用机制主要是结合肿瘤细胞的DNA碱基，抑制DNA的复制，抗肿瘤作用较广，但常会引起骨髓抑制等一系列不良反应。野菊花性微寒，具有消肿解毒，疏散风热的功效，临床常用于治疗咽喉肿痛、疔疮痈肿、风火赤眼