HLA 输血课件.ppt

* HLA基因水平分型方法 正向序列特异性寡核苷酸探针聚合酶链反应技术（PCR-SSOP） 反向序列特异性寡核苷酸探针聚合酶链反应技术 序列特异性引物聚合酶链反应技术（PCR-SSP） 限制性片段长度多态性分型技术（PCR-RFLP） 单链构象多态性分型技术（PCR-SSCP） 直接测序技术（PCR-SBT） 多荧光微珠免疫分析 * 四.HLA与临床医学 HLA与器官移植 HLA分子的异常表达和临床疾病 HLA与疾病的关联 HLA与亲子鉴定和法医学 * HLA与同种器官移植的关系： 供受体间HLA的相似性越强，器官移植的成活率越高。通常最佳的移植物配对关系顺序为同卵双生同胞兄妹近亲远亲无亲缘者。 * 器官和组织移植的一般规律 无血缘关系成员之间的组织或器官移植（同种异型移植，allotransplantation）一般难以成功。 来自他人的植皮通常在两周之内既被排斥而脱落。此后如果再次移植同一供者的皮肤，被排斥速度明显加快（记忆特性）。 宿主和供者之间的血缘关系越近，移植物被排斥的可能性越小。 自体移植物（autograft）成活率可达100%。遗传基因相同的成员（如同卵双胞胎或者同一种纯系动物）之间也能够互相接受移植物。 * 移植排斥反应的一般特点 * 防止移植排斥反应的途径 供者的选择 1、 直系亲属供者（familial grafting）：减少HLA配伍的差异； 2 、 组织配型（tissue typing）：用血清学和分子生物学方法对供者和受者进行HLA 组织型进行鉴定，以确保他们HLA相似或者相同。同种肾脏移植时，HLA-DR配型最为重要，HLA-B、A次之。肝脏中含有大量未成熟树突状细胞DC，在免疫抑制剂的作用下，容易诱导免疫耐受，故HLA配型意义不大。 3 、 交叉配型（cross-matching）：受者的血清与供者白细胞混合后做间接免疫荧光试验以排除受者体内有事先产生的抗供者抗体的可能性； * HLA与输血反应的关系： 多次接收输血者会发生非溶血性输血反应，与受者血液中存在的抗白细胞和抗血小板HLA抗原的抗体有关，因此需多次接收输血者应选择成分输血。 * HLA分子的异常表达和临床疾病 * HLA和疾病关联 * * HLA与法医 由于HLA复合体的高度多态性，个体的HLA复合体可视为伴随个体终生的特异性遗传标记。 HLA基因型和/或表现型的检测，已成为法医学上个体识别和亲子鉴定的重要手段 。 * 五.HLA的生物学功能 1.作为抗原提呈分子参与适应性免疫应答 所谓抗原加工是指天然蛋白质抗原转变成和HLA分子相结合的肽段的过程，这一过程主要在细胞内完成。加工后的抗原肽被转运到细胞表面与HLA分子结合并被T细胞识别，称抗原提成。 通常，外源性蛋白质抗原由递呈细胞（如巨噬细胞） 加工后与HLA- II类分子结合，递呈给CD4+辅助性T（Th）细胞；内源性蛋白质抗原由靶细胞处理后与 HLA- I 类分子结合，递呈给CD8+细胞毒T（Tc）细胞 * * 2.HLA的限制作用 细胞毒性T细胞只能杀伤具有同一表型的病毒感染的靶细胞 巨噬细胞与Th细胞间的相互作用受HLA- II类抗原的约束 Tc细胞与病毒感染的靶细胞间相互作用受HLA- I类抗原的约束 T细胞受体（TCR）既识别抗原，同时又识别HLA分子 * HLA I类分子 * HLA II 类分子 * * 3.参与免疫应答的遗传控制 控制免疫应答的基因称为Ir基因，位于HLAⅡ类基因区。 * 4.诱导自身或同种淋巴细胞反应 HLA分子可作为自身或同种反应的刺激分子从而诱导免疫应答或参与免疫调剂 * 5.参与免疫细胞分化 1）. HLA抗原参与早期T细胞在胸腺的分化 2）. 建立T细胞对自身抗原的中枢性耐受 * 6.作为调节分子参与固有免疫应答 ①经典的Ⅲ类基因编码补体成份，参与补体反应和免疫性疾病的发生。 ②非经典Ⅰ类基因和MIC基因产物可作为配体分子，以不同的亲和力结合激活性和抑制性受体，调节NK细胞和部分杀伤细胞的活性(MIC是NK细胞激活性受体NKG2G的配体)。 ③炎症相关基因参与启动和调控炎症反应，并在应激反应中发挥作用。 * 1)与内源性抗原的递呈（诱导对病毒感染细胞和肿瘤细胞的杀伤和溶解）； 2)作为CD8+T细胞的识别分子（CD8的配体）； 3)参与胸腺内CD8+T细胞的分化、发育； 4)抑制NK细胞的杀伤活性； 5)诱导同种移植排斥反应。 HLA－I生物学功能 * 1)参与外源性抗原的递呈； 2)作为CD4+T细胞的识别分子（CD4的配体）； 3)参与胸腺内C