选精育教中高)21(-学化析分.pptVIP

与固定相的分离效率有关的是 粒度和孔径 粒度越小，均匀性越好，分离效率越高； 表面积 表面积越大，则与样品之间的相互作用越强，即吸附力越强。 聚酰胺是由酰胺聚合而成的高分子物质。色谱常用的是聚已内酰胺 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 C O ‖ N H n 聚酰胺可分离极性和非极性物质 如黄酮、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、苷类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其是对黄酮、酚类、醌类等物质的分离，远比其他方法优越。 （3）聚酰胺 2、展开剂(流动相) 同吸附柱色谱 极性强的溶剂洗脱能力强 常用溶剂的极性强弱顺序： 　　　水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞四氯化碳环己烷石油醚。 展开剂 选择原则： 根据被分离物质的极性 Stahl简图： 极性物质—活度低（活性级大）的吸附剂--极性展开剂 　 混合溶剂 先用单一溶剂展开， 若Rf值太小，则加入一定量极性强的溶剂，如乙醇、丙酮等， 如果Rf值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如环己烷、石油醚等)，以降低极性。 展开中加入少量酸、碱可抑制某些化合物斑点拖尾，使斑点集中。 展开剂中加入中等极性的溶剂（如丙酮）可使不相混合的溶剂混溶、降低展开剂黏度。 （三）薄层色谱操作方法 制板　均匀 点样　集中 自学，实验课讲 展开　(多种方式) 预饱和 显色　 展开 薄层色谱中的展开是在一个具有一定空间和形状的密闭容器中，流动相沿薄层（固定相）运动。 直立双槽色谱缸 卧式色谱槽 圆形色谱缸 展开 展开方式 ↑ → ↖　↗ ↙　↘ ↑↑ ↑ 展开过程中注意溶剂蒸气饱和 边缘效应？ 产生原因？ 防止边缘效应？ 边缘效应 展开剂的蒸气饱和程度影响样品的色谱行为，尤其在使用混合溶剂时更为突出。 同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小，这种现象称为边缘效应。 密闭容器，先用溶剂蒸气饱和。 斑点的定位（确定斑点位置） 有色物质 日光下观察 有紫外吸收 紫外灯下观察 在荧光背景下呈现暗斑 无色物质 喷洒显色剂 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 一、概述 二、平面色谱法的分类和原理 三、薄层色谱法 四、纸色谱法 特点： 方便、快速、成本较低，易于推广 样品的预处理比较简单 应用范围广 展开剂选择范围宽 一、概述 在平面上进行分离的一种色谱方法，主要包括薄层色谱法和纸色谱法。 历史简介 1938年，俄国人Izmailov和Shraiber首先实现了在氧化铝薄膜上分离一种天然产物。 1949年，两位美国化学家报导了用薄层色谱法成功地分离了精油中的萜烯。 1958年，德国化学家Stahl系统描述了用作涂布薄层的材料（薄层色谱固定相）和涂板设备，对薄层色谱技术也进行了规范化描述。 Stahl于1965年出版了《薄层色谱法》一书。 20世纪80年代 出现了仪器化薄层色谱法，薄层色谱的每一步均用仪器来代替以往的手工操作，再配以薄层扫描仪，这样就使薄层色谱法的定量结果的重现性和准确性大大提高。 高效液相色谱法 薄层色谱法 固定相 封在色谱柱内 均匀涂在载板上 样品预处理 要求严格 较不重要，节省时间、溶剂和材料 进样 直接引入流动相，每次一个样 点在固定相上，可同时点几个 色谱分离 通过改变流动相比例来改善分离 恒组分流动相、梯度洗脱 反相色谱占主导地位 可采用不同溶剂系统进 行同向或双向多次展开 正相色谱占主导地位 检测 最常用：UV 最常用：UV 定性 Rt Rf 定量 符合L-B定律 不符合L-B定律 二、平面色谱法的分类和原理 分类 　　薄层色谱法： 吸附薄层色谱法 分配薄层色谱法 分子排阻薄层色谱法 　　纸色谱法:分配 　　薄层电泳法 最佳范围 0.3-0.5 可用范围 0.2-0.8 1、比移值(Rf值) 溶质移动距离与流动相移动距离之比。（速度之比？） a、b为原点至斑点中心的距离， C 为原点至溶剂前沿的距离 （一）定性参数 被分离物质的结构和性质 平面的性质 展开剂的性质 温度 展开剂蒸气饱和程度 影响比移值的因素 2、相对比移值(rel