更多的CREB蛋白.PPT

在行為學實驗結束後，對安樂死的小鼠進行解剖，就能將不久前才被激活、並被Tet Tag系統標記的神經元，與那些已經被標記了較長時間的神經元進行比較。這種方法不僅可以鑒別出被一段記憶激活的神經元（在這種情況下，神經元只會呈現出一種熒光標記），還可以鑒別出在兩段記憶形成過程中都被激活了的神經元：這類神經元會同時發出兩種熒光。 蔡迪卡和她的團隊使用了與之前相同的實驗方案，並且發現，在間隔5小時的情況下，參與段記憶的神經元群體的重合比例，也就是同時被兩種熒光標記的神經元的比例，顯著高於對照組；而在間隔7天的情況下，編碼兩段記憶的神經元群體的重合比例與對照組之間沒有顯著差異。 記憶的標誌物 ? 一些腦區在記憶形成中起著關鍵作用。杏仁核參與了情緒記憶的提取，而海馬區負責經驗性記憶的形成。我們的團隊在一項小鼠實驗中通過提高海馬神經元中CREB蛋白的水平，增强了中年小鼠的記憶能力。 對過去事件的回憶　 ? 馬塞爾·普魯斯特（Marcel Proust）是法國作家，撰寫了著名小說《追憶似水年華》。“普魯斯特時刻”指小說中作者如何從回憶糼年時吃一塊茶糕，聯想到他的姑姑、他生活過的房子，甚至他生活過的小鎮，這些記憶是一個接一個地被回憶起來的。現在這種現象得到了腦科學研究的支持。實驗顯示，如果小鼠先後出現在箱子B和C中的時間間隔是5小時，那麽小鼠對這兩個箱子的記憶將關聯在一起，但是它對間隔了7天的箱子A和C 的記憶並不能關聯在一起。小鼠對箱子B和C的記憶之所以關聯在了一起，是因為儲存B箱記憶和C箱記憶的兩個神經元群體有很高的重合度，並且會在同一時間被激活，這與箱子A和C的情況是不同的。 喬斯林在多倫多的研究團隊為“分配 － 關聯”假說提供了更多的証據。 ? 她的團隊不僅採用了不同版本的神經元標記實驗得到了類似結果，而且還發現了支持“分配 － 關聯”假說的行為學新証據。 ? 多倫多的研究團隊推測，如果編碼兩段記憶的神經元群體有重合，那麽第一段記憶使CREB表達量升高之後，很可能對第二段記憶產生强化作用。 我們的研究是將小鼠放置在不同的環境下，而喬斯林團隊則是訓練小鼠分辨兩種不同的聲音。他們發現，訓練小鼠記住第一種聲音能夠增强它們對第二種聲音的記憶，不過這要求兩種聲音出現的間隔不超過1.5 ~ 6 小時，如果間隔時間被延長至18 ~ 24小時，這種增强效應就會消失。 最近，日本富山大學的井口薰（Kaoru Inokuchi）和同事在這個研究方向上取得了更深一步的進展。他們利用光遺傳學技術，抑制了同時儲存兩段情緒記憶的神經元的活動，但沒有干擾其他神經元——尤其是那些只儲其中一段記憶的神經元。研究人員發現，抑制儲存了兩段記憶的神經元的活動，能夠打破這兩段記憶之間的聯聯性，但並不影響小鼠對每段記憶的提取。這個巧妙的實驗可以直接証明，由兩段記憶共享的神經元在記憶產生關聯的過程中發揮著關鍵作用。這一發現也為我們的“分配 － 關聯”假說增加重要的獨立証據。 增强老年記憶 ? 接下來，我們決定研究一下年長小鼠的記憶關聯情況。與年輕小鼠相比，在年齡較大的小鼠大腦內，海馬CAI區等區域的神經元中的CREB蛋白水平要低一些，這導致了這些神經元的興奮性也較低。根據這一點，我們推測年齡較大的小鼠應該會在記憶關聯方面遇到困難。於是，蔡迪卡和同事使用中齡小鼠重複了我們之前做過的許多實驗。結果令人驚訝。有經驗的科學家都知道，一些假說僅僅是工具，我們不能期望假說一定是正確的。不可避免的失敗能夠幫助我們修正想法，回歸正確的道路。但是這一次，我們的預測應驗了。 我直到現在還記得當時蔡迪卡上氣不接下氣地沖進我辦公室的樣子。她告訴我，雖然中齡小鼠能記住每一個單獨的箱子，但它們很難把這些記憶關聯在一起，對於年輕小鼠來說毫不費力就能跨越的5小時間隔，成了中齡小鼠無法逾越的障碍。微內窺鏡成像結果表明，與青壯齡小鼠相比，年齡更大的中齡小鼠腦內負責兩段記憶的神經元群的重合度偏低。 ? 這一結果讓我和蔡迪卡既興奮又疑慮，因此我們決定從頭開始重複這個實驗。第二次實驗獲得的結果更加具有說服力：中齡小鼠的神經元內CREB蛋白水平更低，不能像年輕小鼠那樣很容易就能實現記憶關聯。 當兩段記憶被分配到相互重合的神經元群體時，它們就會關聯在一起。在這之後，如果再次激活負責其中一段記憶的神經元群體，就會激活另一群神經元，並使其負責的那段記憶在大腦中重現。 ? 這些發現讓我們開始擴展研究範圍。我們是否可以在中齡小鼠探索兩個箱子的時候，人為增强CAI區神經元的興奮性，以確保在第一個箱子中被激活的神經元在小鼠進入第二個箱子時也能夠被激活？ 為了實現這個目的，我們使用了一種開創性的技術，通過基因工程手段，在神經元的細胞膜上插入一種受體，從而控制神經元的功能。這種技術有一個令人難忘的縮寫——DREADD，它的含義為“設計受體僅能被專