高效液相法测定保心片中丹参酮ⅡA的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相法测定保心片中丹参酮ⅡA的含量 肖文平 王菊萍 （黄冈师范学院化学与应用化学学院 湖北黄冈 438000） 【摘要】目的 建立保心片的质量控制方法。方法 采用HP-Agilent 1100高效液相色谱仪,流动相为甲醇：水=85：15，检测波长为270nm，流速：1.0ml/min，柱温30℃。结果 其主要成分丹参酮ⅡA浓度在0.018—0.08mg/ml(r=0.9975)范围内与峰面积呈良好线性关系。平均加样回收率为100.2%，RSD值为1.57%（n=5）。结论 此条件下采用高效液相色谱法进行含量测定灵敏度好，精确率高。 【关键词】 保心片 质量研究 高效液相色谱法 丹参酮ⅡA 【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2013）13-0323-01 保心片是一种中成药制剂，由三七、丹参、川芎、山楂、制何首乌、何首乌六味中药精制而成，具有活血化瘀、滋补肝肾之功效。该制剂为本校制药工程实验室自制制剂。目前市售的抗心绞痛中成药较多，大多数也都具有较完善的质量控制体系,但对保心片尚无完备的质量控制体系。笔者利用高效液相色谱法对其所含丹参酮ⅡA进行了含量测定，并以此作为质量控制指标。 1 仪器与试药 HP-Agilent 1100高效液相色谱仪；KQ-600DB型数控超声波清洗器；除高效液相色谱检测所用试剂为色谱纯，其它试剂均为分析纯；二次蒸馏水；丹参酮ⅡA对照品由中国生物制品检定所提供（批号0766 ndash; 200703）。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18（5m，4.6mmtimes;250mm）,流动相为甲醇：水=85：15，检测波长为270nm，柱温30℃，流速：1.0ml/min，进样量:20mu;l[1,2]。理论塔板按丹参酮ⅡA计算，应不低于2000。 2.2 溶液制备 2.2.1 保心片（样品）溶液的制备 取100片保心片碾粹后装入250ml圆底烧瓶中，加入工业乙醇，用电热套加热回流提取两小时，提取三次，合并提取液，过滤，将滤液在旋转蒸发仪上浓缩至粘稠状，干燥，加少量甲醇溶解，转移至50ml锥形瓶中并定容至刻度。然后精密量取1ml加入到25ml棕色容量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀放好作为样品溶液[3]。 2.2.2 丹参???ⅡA对照品溶液的制备 用分析天平准确称取丹参酮ⅡA对照品11.6mg，装入50ml棕色容量瓶中，加入甲醇并定容至50ml摇匀即得。 2.2.3 阴性对照溶液的制备 按保心片处方比例，取除丹参外的其余药材，加适量工业乙醇提取三次，合并提取液，抽滤，浓缩并干燥，加入甲醇溶解，转入50ml锥形瓶中并定容至刻度。然后取1ml转入至25ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度并摇匀即得。 2.3 阴性对照试验 分别对样品溶液，阴性对照溶液，丹参酮ⅡA对照品溶液进行进样20mu;l，结果表明在丹参酮ⅡA相同的保留时间除无干扰，色谱图如下： A: 丹参酮ⅡA对照品溶液 B: 样品溶液 C: 阴性对照溶液 2.4 方法学考察 2.4.1 线性关系考察 分别取50ml容量瓶中对照品溶液2，4，6，8，10ml,加入到25ml容量瓶中分别加入甲醇定容至刻度，摇匀放好。标号1，2，3，4，5。在上述实验条件下精密吸取5个瓶中的溶液20mu;l，分别进样。并记录峰面积。以峰面积(A)对溶液浓度（C）做线性方程，由图看其线性关系良好，回归方程为：A=4*107 C-158191，R2=0.9975. 丹参酮ⅡA在0.018—0.08mg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系。 2.4.2 精密度试验 精密吸取丹参酮ⅡA对照品②号溶液20mu;l（0.03712mg/ml），分别进样5次，记录峰面积分别为1502451，1505682，1506296，1504822，1508845。结果峰面积的RSD值为0.3% 2.4.3 稳定性试验 精密吸取样品溶液于0，2，4，6，8，10小时分别进样20mu;l，其峰面积值分别为1709543，1708630，1708543，1709272，1708741，1708952