高蛋白饮食对肝硬化大鼠认知和大脑代谢的影响.docVIP

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高蛋白饮食对肝硬化大鼠认知和大脑代谢的影响

精品论文 参考文献 高蛋白饮食对肝硬化大鼠认知和大脑代谢的影响 厦门大学附属第一医院 【摘 要】目的 探讨高蛋白饮食对胆总管结扎(BDL)致肝硬化模型大鼠运动功能、焦虑、记忆过程的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术(SHAME)标准饮食对照组(Scon组)、假手术(SHAME)接受高蛋白饮食的对照组(Scon-P)组、胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)标准饮食(Bcirr)组、胆总管结扎(BDL)接受高蛋白饮食的胆总管结扎组(Bcirr-P)。选用一些行为实验检测大鼠运动功能、焦虑水平,评估参考记忆和空间记忆的损害。使用细胞色素氧化酶免疫组化评估中枢神经系统区域的代谢活动。结果 旋转实验和十字迷宫四组均保持运动功能和正常焦虑水平;胆总管结扎(BDL)组不管何种饮食,空间记忆和主动回避行为均受损(P <0.01)。然而,接受高蛋白饮食的肝硬化鼠在空间记忆任务中显示较长的逃脱潜伏期(P <0.01)。胆总管结扎组海马和下丘脑显示能量活化不足(P <0.01)。结论 胆管结扎(BDL)高蛋白摄入组加重了肝硬化空间记忆障碍和主动学习任务,改变了运动和焦虑水平,且胆管结扎高蛋白饮食组并未影响到细胞色素氧化酶的细胞活性减退。 【关键词】肝昏迷;饮食;主动回避;空间参考记忆;细胞色素氧化酶;中枢神经系统 肝性脑病是肝病患者发生的的中枢神经系统的并发征,肝性脑病的患者表现为神经肌肉、神经精神病学、行为异常的症状。肝性脑病的患者认知功能的异常主要是以记忆力减退、注意力不集中、执行功能障碍和空间定向障碍为特点[1]。运动症状也在肝性脑病患者中出现[2]。智力活动异常主要是由于受损的肝脏不能代谢神经毒物,导致其在大脑的累积,从而影响神经递质和组织形态学细胞的变化,其中主要影响大脑星形胶质细胞[3]。 目前已经有许多动物实验模型已经建立并研究肝性脑病,尽量复制慢性肝硬化的临床特性、认知和运动症状。几例临床研究报道慢性口服四氯化碳可引起学习和空间记忆相关的损害[1]。此外,慢性四氯化碳动物模型包含了神经元和星形胶质细胞体积的变化,这些变化可影响到海马和乳头体核相应区域[1]。 早期临床研究发现饮食和肝性脑病的关系,表明高蛋白饮食可以促进肝功能衰竭患者肝性脑病的发展[6]。然而,虽然近期研究不再支持此观点,临床医师们仍然支持肝性脑病患者尽量避免富含高蛋白饮食[7]。目前关于高蛋白饮食对肝性脑病模型大鼠的认知功能和已知与认知有关的神经元代谢活动区域的影响的实验仍无发表。基于此,目前研究目的是通过各种行为测试来评估高蛋白饮食对胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠的行为影响,通过标记有免疫组织化学的细胞色素氧化酶方法研究不同大脑区域氧化代谢,这些区域有常常与空间记忆相关。细胞色素氧化酶是一种线粒体酶,参与氧化磷酸化反应释放ATP,是细胞主要能源来源。在肝性脑病模型中,细胞色素氧化酶免疫组化已经被用来研究神经元代谢.。 材料与方法 1.材料和仪器:细胞色素氧化酶单克隆抗体购自北京乐博公司(以色列Fitzgerald)。主要仪器:Rotard转动仪(美国IITC 公司),Morris水迷宫实验、高架十字迷宫、矿场实验箱就(安徽正华仪器设备),Morris水迷宫视频跟踪系统(MT-200,中国成都泰盟),Odyssey红外荧光扫描成像系统(9120,美国LI-COR)多功能酶标仪(Infinite M200,瑞士Tecan)。自动穿梭盒子里实施(西班牙 Barcelona公司)。 2.动物及分组:40只Wistar大鼠(平均体重50-60g,厦门大学实验动物中心提供)。大鼠随即分为四组:假手术对照组(Scon组,n=10);假手术组接受高蛋白饮食的对照组(Scon-P,n=10)组、胆总管结扎组(Bcirr,n=10)组、胆总管结扎接受高蛋白饮食的胆总管结扎组(Bcirr-P,n=10)。假手术组暴露单重管后关腹。模型组结扎胆总管后关腹。期间,大鼠单独在笼子中喂养。治疗4周后,为了尽量减少动物的隔离影响,大鼠在治疗期间直至实验结束,每5只安放在1只笼子里,在4周期间,假手术组(Scon和Scon-P组)隔离并接受自来水喂养。4周结束后每4-5只老鼠安置在1个笼子。然后Scon-P组和Bcirr-P组给与高蛋白饮食,Scon组和Bcirr组继续给予标准饮食喂养(表1)。4周后给与行为学检测。动物饲养温度:(22plusmn;2)℃,65-70%相对湿度,12h室内光照-黑暗周期(08:00到20:00/20:00-08:00),动物标准饮食喂养。实验开始时测体重,在实验结束时测量体重增重(BWI)和

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