鼻咽癌患者放疗后血浆EBV-DNA检测的随诊意义.docVIP

精品论文 参考文献 鼻咽癌患者放疗后血浆EBV-DNA检测的随诊意义 广东省深圳市人民医院放疗科 518020 【摘 要】目的：探讨血浆EBV-DNA定量分析在鼻咽癌患者放疗后随诊中筛查鼻咽癌转移或复发的价值。方法：应用荧光定量PCR技术，检测210例根治放疗后鼻咽癌患者血浆EBV-DNA水平，并与临床、影像、鼻咽纤维镜及病理检查结果进行比较分析。结果：210例患者中48例血浆EBV-DNA检测阳性，162例阴性。在48例检出阳性者中，25例证实为鼻崖癌临床复发，11例证实为远处转移，4例证实为既有复发，又有远处转移，故其预测肿瘤进展阳性预测值为83.33%（40/48）；在156例临床缓解患者中，共有148例血浆EBV-DNA检测阴性，故其诊断特异性为94.87%（148/156）；放疗后缓解组患者血浆EBV-DNA阳性率为5.12%（8/156），与放疗后复发或转移组患者血浆EBV-DNA阳性率[83.33%（40/48）]比较差异有显著性（P＜0.01）；放疗后缓解组患者血浆EBV-DNA中位拷贝数为0 copy/mL，与放疗后复发或转移组患者血浆EBV-DNA中位拷贝数（＞1 000copy/mL）比较差异有显著性（P＜0.01）。结论：血浆EBV-DNA的实时定量PCR分析对放疗后鼻咽癌患者的筛查有实用价值，是监测放疗后鼻咽癌患者转移、复发的重要指标。 【关键词】鼻咽肿瘤；EBV-DNA；诊断；复发 【中图分类号】R739.6【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-07-032-02 鼻咽癌在我国南方高发，系恶性程度较高的肿瘤，放谢治疗是首选的治疗方式。治疗失败的主要原因是局部区域复发或远处转移，因此，放射治疗后的鼻咽癌患者仍要定期复查，以便及早发现小的转移灶或复发病灶，再及时给予进一步的治疗，以提高最终治疗效果。 鼻咽屿EB病毒密切相关，检测EB病毒的相关抗体是诊断及监测患者病情变化的常用方法。近年来，由于定量PCR技术的发展，直接定量检测血浆中游离病毒DNA逐渐受到重视。有报道，测定血清中的EBV-DNA拷贝数可作为诊断及监测患者病情变化的手机之一，荧光定量PCR技术定量检测鼻咽癌患者外周血浆EB病毒DNA的拷贝数，也有希望作为鼻咽癌放疗后随诊一种新的有效手段，及时筛查较早复发、转移患者。 1 资料与方法 1．1 一般资料 选择2006年3月至2008年12月本院210例根治性放疗后的鼻咽癌患者，所有患者初诊时均经病理学诊断为非角化型未分化癌或分化癌（WHO分类）接受根治性放射治疗。其中男120例，女90例，年龄17~82岁，中位年龄50岁。距放疗结束时间3~24个月，中位时间15个月。 1．2 临床检查方法 临床检查内容包括鼻咽MRI（包括颅底和全颈）、电子鼻咽镜检查、胸部X线片、腹部B超、全身骨核素扫描检查。胸片或腹部B超有可疑转移则行胸部或腹部CT扫描。鼻咽部临床诊断需行鼻咽部活检并经病理检查证实。 1．3 实验方法 荧光定量PCR反应EB病毒核酸扩增荧光检测试剂盒购买自中山大学达安基因股份有限公司，包括DNA提取液、临界阳性质控品、强阳性质控品、阳性标准品、阴性质控品以及PCR反应管等。所扩增的目的基因来自EBV-DNA的EBNA-1片段，上下游引物分别为：5rsquo;-2GTAGA AGGCC ATTTTTCCAC-3rsquo;和5rsquo;-TTTCT ACGTG ACTCC TAGCC-3rsquo;。每批PCR反应用克隆合成的EB病毒W片段作为阳性对照，并稀释成不同的浓度梯度（106、105、104、103、103、102、101copy/mL）进行PCR反应；用蒸馏水作为阴性对照。PCR反应在PE7700自动荧光PCR仪上进行。 1．4 随访 210例患者随访截止时间为2008年12月31日，中位随访时间15（3~24）个月，经临床检查证实放疗后缓解156例，局部复发31例，远处转移19例，4例证实既有复发又有远处转移，复发和转移病例均接受进一步放疗、化疗。 1．5 统计学分析 使用SPSS10.0统计软件，EB病毒DNA拷贝数的比较用Mann-Whitney U 非参数秩和检验（Mann-Whitney U检验），组间阳性率比较采用X2检验。 2 结果 2．1 随诊情况 抽血进行血浆EBV-DNA检测时，210例患者随访截止时间为2008年12月31日，中位随访时间15（3~24）个月，经临床检查证实放疗后缓解156例，局部复发31例，远处转移19例，4例证实既有复