鼻窦炎合剂的体外抑菌作用探究.docVIP

精品论文 参考文献 鼻窦炎合剂的体外抑菌作用探究 张霞 陈迎平 　　（盐城市第一人民医院 224000） 　　【摘要】目的 研究鼻窦炎合剂体外抑菌作用。方法 通过二倍稀释法分析鼻窦炎合剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌、流感杆菌的抑菌活性。结果 鼻窦炎合剂对以上6种菌种的MIC值分别为31.37mg/m L，62.53mg/mL、15.79 mg/mL、15.79 mg/mL、7.74mg/mL 、62.53mg/mL。结论 鼻窦炎合剂有明显的抑菌效果。 　　【关键词】鼻窦炎合剂 体外抑菌方法 最低抑菌浓度（MIC） 　　【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）14-0258-01 　　鼻窦炎合剂为我院研制的由柴胡、白芷、麻黄、银花、黄芩、等组成的纯中药制剂。其功效主要为驱风散寒，排脓止痛，宣通鼻窍，清热抗炎，主治急慢性鼻窦炎，鼻炎所致的鼻塞、流浊涕、头重、头昏等。采用现代医药科技方法研制而成，保持原方特色，安全有效。经136例临床观察，总有效率达 97.1%。现采用体外抑菌试验，对本品的抑菌作用进行初步探讨，为临床应用提供科学依据。 　　1 实验材料 　　1.1样品:鼻窦炎合剂，批盐城市第一人民医院中药制剂室提供。 　　1.2菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌、流感杆菌，以上均为中国药药科大学基础医学微生物教研室提供。 　　2 实验方法[1，2] 　　2.1供试菌及菌液配制:生长较快的细菌，如金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，取经37℃6h孵育的肉膏液(此时菌液浓度约为9亿/m1)，试验时用肉膏液作10-3稀释备用;生长较慢的细菌，如溶血性链球菌和肺炎双球菌，取经37℃ 18h孵育的肉膏培养物，菌液浓度约3亿/ml，用时再以肉膏液作10-3稀释备用。 　　2.2合剂和试验药液的制备 　　2.2.1合剂的制备工艺 （1）提取纯化：先将柴胡、白芷、薄荷、春花、细辛等药物用蒸馏法提取挥发油(约7000ml)。残渣与其它药物合并，常规煎煮3次，(1.5h、1h、1h)，合并煎液，纱布粗滤，离心分离，减压缩至适量。放冷、加二倍量高浓度乙醇，使药液含醇量为60%，充分搅拌，密闭静置，溶液沉淀24h以上，吸取上清液，并用60%乙醇洗涤沉淀物3次，使有效成分提取完全，合并含醇药液，减压回收乙醇至无醇味。（2）配制：加水至20000ml，煮沸30min，冷藏48h。滤过，加入糖液，防腐剂、挥发油，加水至3万ml，(3)消毒分装：配置液滤过后，100℃流通蒸气灭菌60分钟后，在1万级净化区内分装成每瓶250毫升（250毫升玻璃瓶及瓶塞预先处理并消毒备用）。 　　2.2.2试验药液的制备 取经灭菌后备用的鼻窦炎合剂（含生药2g/ml）的混悬液，用培养基稀释为1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.01562、0.00781、0.00391、0.00195g生药/ml.。 　　2.3最低抑菌浓度（MIC）的测定 按体外抑菌试验二倍稀释法[3、4]， 取试管于每管中加无菌培养基2.0ml，然后于第一管中加人灭菌的供试液2.0m1，混匀后取出2.0ml放人第二管中，依此类推，将鼻窦炎合剂相应细菌的培养基稀释成1:2， 1:4， 1:8， 1:16， 1:32， 1:64， 1:128， 1:256，1:512，1:1024等系列浓度管，同时设不加药液加菌液的阳性对照管、不加药液和菌液的阴性对照管及只加药液的药液对照管。然后每管加人0.lml稀释10-3倍的新鲜菌液，混匀，于37℃的培养箱中培养16-24小时，肉眼观察结果，看有无浑浊现象出现，确定细菌不生长的最高药物稀释度为该制剂的最低抑菌浓度(MIC)。结果见表1。 　　表1 鼻窦炎合剂体外抑菌试验结果 　　稀释度 浓度 大肠 金黄色葡 甲型溶血 乙型溶血 肺炎链 　　流感 　　 (g/ml) 杆菌 萄球菌 性链球菌 性链球菌 球菌 杆菌 　　1:2 1.10031 - - - - - - 　　 　　注:-表示培养基清，无菌生长;+表示培养基混浊，有菌生长。 　　3 结果 　　实验结果见表I。大肠杆菌有生长则培养基呈混浊，底部有粘性沉淀;金黄色葡萄球菌生长培养液变混浊，液面呈黄色;溶血性链球菌和肺炎链球菌、流感杆菌生长，培养液均变混浊。实验结果表明，鼻窦炎合剂对大肠杆菌的MIC值为62.53mg/ml