转录2014-1.ppt

The antisense transcriptomes of human cells RNA聚合酶保护法 原核生物转录起始区域的序列特征 -10区：TATAAT一致性序列（Pribnow box）， 是双螺旋打开形成起始复合物的区域； -35区：TTGACA一致性序列，是RNA-pol对转录起始的识别位点。 RNA聚合酶与启动子的结合 原核生物转录过程： 原核生物基因结构 操纵子(operon) 　原核生物一个转录单位或转录区段，包括若干个结构基因及其上游调控序列。 启动子（promoter） 　 RNA聚合酶全酶结合模板DNA的部位，也是控制转录的关键部位。 5?3? 3?5? 结构基因 调控序列 RNA-pol 开始转录 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5? 5? RNA聚合酶保护区 结构基因 3? 3? 原核生物启动子序列特征 原核生物启动子序列特征 原核生物的转录起始 σ亚基辨认-35区 RNA pol 全酶移向-10区 合成第一个磷酸二酯键 转录起始复合物 （结合松弛） （结合紧密） pppGpN-OH RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? （二）转录延长 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 1. 识别结合富含C的RNA链 2. ATPase活性 3. 解螺旋酶(helicase)活性 ρ因子 : 1. 依赖 Rho因子的转录终止 ρ因子 +ATP 5′ 3′ Polymerase 富含C DNA pol 5′ 3′ RNA pol失活 ρ因子解螺旋酶活性使DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放。 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 特点： 1. RNA单链内部接近终止区域有富含G-C配对区，形成稳定的二级结构。 2. 在发夹结构的下游有poly U结构。 茎环（stemloop）或发夹（hairpin）结构 RNA转录后，形成特殊的结构，以终止转录。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCGACUUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 小　结 转录的基本规律 　模板、方式、方向、引物 RNA聚合酶 　原核、真核 原核生物转录过程 　 复习题 名词 　模板链，核心酶/全酶，启动子 简述 　1. 讨论并比较DNA聚合酶与RNA聚合酶间异同点； 2. 简述原核生物基因转录过程。 * 第 十 六 章 RNA的生物合成（转录） RNA Biosynthesis, Transcription 转录 (transcription) 　　生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 RNA DNA 转录的意义何在？ DNA RNA 蛋白质 Replication Translation Transcription Reverse transcription 转录是如何发生的？ 转录的基本规律是什么？ 转录的执行者是什么？ 转录的详细过程如何？ 转录过程中的特殊情况？ 转录的基本规律是什么？ 全部还是部分DNA序列发生转录？ 以那一条DNA链为模板？ 全部还是部分DNA序列发生转录？ 人类基因组共3×109对碱基