重组蛋白制备PPT.ppt

阿拉伯糖表达系统： 大肠杆菌RNA聚合酶负责转录pBAD启动子控制的外源基因转录。属于严紧型表达系统，目标蛋白mRNA分子的转录过程可以通过诱导物的调控来达到严格的开放/关闭状态，诱导物L-阿拉伯糖(L-arabinose)浓度连续变化实现外源重组蛋白表达水平的连续调控。无诱导物时，pBAD启动子控制的外源基因的转录受araC蛋白抑制。 色氨酸－lacI表达系统（Trp-lac）： 大肠杆菌RNA聚合酶转录Ptrp启动子控制的外源基因转录。诱导物为IPTG，无诱导物时，外源基因的转录受lacI蛋白抑制。 真核表达系统 酵母表达系统 啤酒酵母，可表达在啤酒酵母细胞内的表达载体上编码的重组蛋白；甲醇酵母，表达的重组蛋白的编码基因与各种必需的表达元件已整合到甲醇酵母基因组中。 昆虫表达系统 具有昆虫特异性的启动子，外源基因处于启动子下游。 哺乳细胞表达系统 哺乳细胞病毒特异性启动子，外源基因处于该启动子下游，调控外源基因转录过程。 生物加工厂 转基因动物，基因组中整合了目标蛋白的编码基因与表达元件，转寄因鸡、猪、牛、羊等 无细胞翻译系统 大肠杆菌无细胞翻译系统 即大肠杆菌细胞裂解液。大肠杆菌细胞有一定要求，一般是核酸酶与蛋白酶缺失突变株，核酸酶缺失大大降低了mRNA的降解，而蛋白酶的缺失降低了合成的目标蛋白的降解，从而提高目标蛋白产