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医学论文-移植干细胞MRI示踪中呼吸伪影消减方法初探 【摘要】? 目的： 探讨磁共振成像（MRI）示踪移植干细胞中消减呼吸伪影的方法。方法：　 成功制作的急性心肌梗死模型猪共21头，1周后实验组（15头）经冠状动脉植入超顺磁性氧化铁纳米颗粒（SPIOs）标记的骨髓单个核细胞（BMMNCs）；对照组（6头）注入生理盐水。4周后行ＭＲＩ检查，方法一（n＝8，2例来自对照组）：戊巴比妥钠全身麻醉，胸带加压固定后行MRＩ检查；方法二（n＝13，4例来自对照组）：戊巴比妥钠全身麻醉，气管插管，简易呼吸器控制呼吸，胸带加压固定后行MRＩ检查。扫描图像分为３个等级：图像对比度、清晰度好,评为优秀；能进行诊断但图像噪声较大，评为良好；噪声大、伪影重影响诊断或不能诊断，评为差。结果：　 方法一中优秀2例，良好3例，较差3例；方法二中优秀5例，良好6例，较差1例，因气管插管导致皮下气肿而死亡1例。方法二中图像质量优于方法一，等级秩和检验无统计学意义（Ｐ＞0.05）。结论 ：　利用简易呼吸器控制呼吸可以有效消减MRI中的呼吸伪影，但操作相对复杂，须熟练掌握气管插管术。 【关键词】? 干细胞 磁共振成像 呼吸伪影 猪 ??? 移植细胞的磁共振示踪除必须优良的标记物外，对影像质量亦提出了极高的要求，尽管目前高场强的磁共振仪已投入使用，但如呼吸伪影控制不佳，仍将使图像的空间分辨率降低，影响实验结果的最终评判。如何降低磁共振扫描中实验动物的呼吸伪影，作者对此作初步探讨。 ??? 1? 材料与方法 ??? 1.1? 实验材料 ??? 1.1.1?? 实验动物? 21只健康中国小型雄性家猪，2月龄，体重20～30kg（东南大学实验动物中心提供）。 ??? 1.1.2? 主要试剂及设备? 超顺磁性氧化铁纳米颗粒（superparamagnetic iron oxide nanoparticles，SPIOs；东南大学纳米技术研究中心实验室制备）、氯胺酮、戊巴比妥钠、喉镜、简易呼吸器和3.0T磁共振仪（Magneton Trio，Simens Medical Systems）。 ??? 1.2? 实验方法 ??? 1.2.1? 骨髓单个核细胞（BMMNCs)的分离、标记及培养? 从猪的髂骨抽取骨髓10ml，肝素抗凝，Ficoll淋巴细胞分离液（Sigma公司）梯度离心，分离提取BMMNCs［1］，用含10％的胎牛血清低糖型DMEM培养液调节细胞浓度至（1～2）×106ml－1，ＳＰＩＯs标记，铁最终浓度为25μg·ml－1［2］。 ??? 1.2.2? 制备猪急性心肌梗死模型及实验分组? 实验动物以3％戊巴比妥钠耳缘静脉全身麻醉，Seldinger法穿刺外周股动脉，选取左前降支（left anterior descending，LAD）远端1/3为封堵处，球囊阻断血流1h，1周后１５头猪以OTW球囊导管于LAD输入标记的BMMNCs作为实验组，6头猪注入生理盐水用作对照。 ??? 1.2.3? 磁共振成像检查? 移植后4周行磁共振检查，置心电门控，行心脏长轴和短轴位扫描。在体视野(FOV)22cm×22cm；激励次数3；层厚5mm，层间距1mm；矩阵256×192。成像序列：（１）自旋回波（SE）序列为T1WI，TR 600ms，TE 22ms；(2)快速自旋回波(FSE)序列为T2WI，TR 2500ms，TE １08ms，回波链 16；（３）梯度回波序列(FE)为T2*WI，TR 600ms，TE 22ms，反转角30°［3］。磁共振检查前处理如下： ??? 方法一（n＝8，2例来自对照组），肌肉注射氯胺酮200～300mg，将猪仰卧固定于操作台，迅速在猪耳静脉建立静脉通路，静脉注射3％戊巴比妥钠(60mg·kg－１)麻醉，胸带加压固定后施行磁共振检查，每20～30min重复静脉注射3％戊巴比妥钠150mg，保持麻醉状态。 ??? 方法二（n＝13，4例来自对照组），麻醉同方法一，喉镜直视下经口行气管插管，简易呼吸器控制呼吸，胸带加压固定后施行磁共振检查，扫描过程中暂停挤压气囊达到人为屏气，实验中密切观察猪生命体征。 ??? 结果由3位多年从事影像诊断的医师进行评价，图像质量分为3个等级：图像对比度清晰度好,评为优秀；能进行诊断但图像噪声较大，评为良好；噪声大伪影重影响诊断或不能诊断，评为差。 ??? 1.3? 统计学分析 ??? 采用SPSS 11.5软件处理，组间比较采用等级秩和检验，P0.05表示差异有统计学意义。 ??? 2? 结??? 果 ??? 2.1? 核磁共振扫描结果 ??? 根据磁共振心肌梗死判断标准，21例实验动物心肌梗死模型均制备成功，梗死部分位于左心室心尖部，部分累及室间隔、左室下后壁及部分右室下壁，表现为梗死肌壁变薄，运动