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医学论文-Y染色体AZF基因缺失检测与男性不育 【关键词】? Y染色体 少精液症 基因缺失 不育 男性 　　目前世界上已婚育龄夫妇中约10%～15％的夫妇不育，其中男性不育因素约占50％，引起男性不育常见原因有营养不良、内分泌疾病、环境毒物、生殖道炎症、精索静脉曲张、隐睾、核型异常(克氏征)及免疫异常等因素，其中由于遗传缺陷包括基因突变和染色体异常所引起的精子发生障碍约占30%以上［1］。除输精管梗阻、腮腺炎病毒感染等明确原因外，还有相当一部分精子发生障碍的男性不育找不出病因，因此有关原发性无精子症及严重少精子症的遗传因素日益受到重视。随着对精子发生的细胞遗传学和分子生物学等领域的深入研究以及分子生物学检验技术的发展，人们逐步认识到引起无精症的基因——无精因子(azoospermia factor，AZF)位于Y染色体长臂(Yq)，这一区域的异常和大多数原发性无精子症密切相关。现将Y染色体微缺失（AZF基因缺失）与男性不育的研究状况作如下综述。 　　1? Y染色体上AZF区域及基因分布 　　人类的Y染色体由长臂（Yq）和短臂（Yp）构成，其包含了约2％的基因。Y染色体对性发育和精子发生是必需的，Y染色体上特殊基因的缺失、点突变和微重排等异常均可影响男性生精功能。由于Y染色体的基因都是单倍体，Y染色体的微缺失即使是一个基因也有可能产生明显效应［2］，Dohle等［3］对原发性无精子症和少精子症患者进行分析，均发现存在Y染色体微缺失（Y chromosome microdeletions），提示Y染色体微缺失可能是男性原发不育的一个重要遗传因素，某些基因片段的丢失可能造成生精障碍，1976年Tiepolo［4］发现男性不育患者Y染色体长臂1区1带（Yq11）存在着断裂现象，因此提出Y染色体长臂存在与精子发生相关基因，并命名为AZF，AZF为多基因家族，Vogt等［4］发现，Y染色体微缺失存在于3个不同的区域，即Yq11的近段、中段和远段，因此认为在这3个区域内均存在AZF基因，分别命名为AZFa，AZFb和AZFc。有研究人员［5］发现在AZFb和AZFc之间还存在AZFd，但该区是否存在仍有争议。 　　1.1? AZFa区? 　　AZFa位于Yq近侧缺失区间interval 5内，估计长度为1～3Mb。AZFa包含的基因有USP9Y，DBY，TB4Y和UTY，这些???因均与X染色体有同源性并在许多组织中表达，也是男性遗传性不育相关的AZFa候选基因［6］，其中USP9Y是AZFa的最佳候选基因。USP9Y是最早发现的AZFa候选基因，大小为159kb含有46个外显子，对原发性无精症和严重少精症患者进行USP9Y检测时发现USP9Y缺失的病例均表现为原发性无精子症，表明USP9Y的微缺失将导致生精障碍及睾丸发育不良，但其缺失率较低。单纯AZFa的缺失较少见，约占Y染色体微缺失的1％～5％，但AZFa缺失的患者最为严重，大多表现为唯支持细胞综合征（SCOS），同时有睾丸体积的缩小。 　　1.2? AZFb区? 　　AZFb位于Y染色体缺失区间interval 5～6近侧端，大小约1～3Mb。已识别的AZFb区基因有：RBMY(RNA binding motif Y chromosome)，CDY(chromodomin Y)，XKRY，SMY和eif-1。最佳候选基因RBMY是第一个被确定与精子发生相关的基因。RBMY家族，是1993年英国学者Ma等［7］首次分离和克隆定位于Y染色体长臂的DNA片段，该片段的氨基酸序列与RNA结合家族中的识别基序(RNA recognition motif，RRM)具有明显的同源性。RRM在睾丸内特异性表达，研究表明［8］所有AZFb缺失的男性均未发现RBMY基因的完全缺失，提示RBMY的活性拷贝是不能被去除的。另外CDY基因也是与精子发生密切相关的基因家族，它包括3个成员，分别为CDY1major、CDY1minor和CDY2。CDY的功能目前还不完全清楚，可能与精子的发生有关，尤其CDY1作用较明显。AZFb基因全部缺失的患者表现为生精阻滞，主要停留在精母细胞或精子细胞阶段，部分缺失时，临床表现多样化，包括SCOS，无精子症或少精子症；如果同时伴有AZFa或AZFc的缺失，则表现为SCOS或生精阻滞。 　　1.3? AZFc区? 　　AZFc位于异染色质邻近异染色质区，长度约为1.5 Mb，近侧区又划分出AZFd区。目前已识别的AZFc基因有DAZ（deleted in azoospermia，DAZ），PRY，BPY2，TTY2，CDY和RBMY。最佳候选基因是DAZ基因，DAZ为多拷贝基因，称为DAZ家族［9］。DAZ编码的蛋白质与RBMY基因家族编码的蛋白质有相似的结构并在生精细胞中特异