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第三篇;第三篇《基因信息的传递》内容: 第十章 DNA的生物合成 第十一章 RNA的生物合成 第十二章 蛋白质的生物合成 第十三章 基因表达调控 第十四章 基因重组与基因工程;本篇内容的学习方法建议: 掌握基因信息传递的基本过程; 重点掌握基因信息传递、调控和基因工程 的机制、重要酶类和主要物质的作用; 理清DNA、RNA、蛋白质之间信息传递关系; 注意基因信息传递异常与疾病的关系。 ;第三篇 基因信息的传递 基因(gene):生物活性产物编码的DNA功能片段,以碱基排列顺序贮存遗传信息。由Johannsen于1909年首先提出。 中心法则(central dogma) :1958年F.Crick提出。1970年H.Temin发现逆转录现象,补充中心法则。;DNA;?一、半保留复制 (semi-conservative replication)? DNA复制时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板,按碱基配对规律合成与模板互补的子链,形成子代DNA双链,其中一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则是合成的,故称半保留复制。 ;A G A A C T T;半保留复制的实验依据 1958年,Messelson 和stahl 用实验证实。 1. 细菌在含15NH4Cl的培养液中培养若干代,密度梯度离心分离出DNA是含15N的重DNA。图 2. 把含15N-DNA的细菌放14NH4Cl培养液中培养,子一代DNA是中等密度DNA 。图 3. 继续培养出子二代,其DNA是中等密度DNA与普通DNA各占一半。图;半保留复制的意义 按半保留复制方式,子代保留了亲代DNA的全部遗传信息,体现了遗传过程的相对保守性。 遗传的保守性是相对的,而不是绝对的。自然界还存在着普遍的变异现象。;DNA复制时,从复制起始点(origin)向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。图 ;原核生物是单复制子双向复制。其环形DNA为单复制子,只有一个复制起始点。 图 真核生物是多复制子双向复制。其线形DNA有多个复制起始点,形成多个复制子。图 (复制子是独立完成复制的功能单位,一个复制起始点起始的DNA复制区域称为复制子replicon )。;三、半不连续复制 ? 领头链(leading strand) :复制方向与解链方向一致的子链。领头链复制是连续的。图 ? 随从链(lagging strand) :复制方向与解链方向相反的子链。随从链的复制是不连续的,形成多个冈崎片段。图 冈崎片段(Okazaki fragment):1968年日本科学家冈崎用电镜观察到,原核生物大小在一千至二千核苷酸,真核生物数百个核苷酸。;;;;;2、DNA-pol II 有3` →5`核酸外切酶活性和聚合酶活性,主要参与DNA损伤的应急状态修复(sos修复)。;323个氨基酸; DNA-pol I作用: 切除引物和突变片段; (5`→3`核酸外切酶活性)图 复制和修复中的空隙填补; (DNA聚合酶活性) 复制中的错误校读。 (3→5`核酸外切酶活性)图;; (一)核酸外切酶活性和校读 3`→5`外切酶活性是复制进行中校读辨认错配的碱基并加以切除。5`→3`外切酶活性,是切除引物和突变片段 。图 DNA -pol I具有3`→5`和5`→3`外切酶活性,DNA-pol Ⅲ 、II只有3`→5`外切酶活性。; DNA-pol Ⅲ的ε亚基有3`→5`外切酶活性和碱基选择功能。 DNA复制的保真性,依赖三种机制: ①? 遵守严格的碱基配对规律; ②? 聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能; ③? 复制出错时有即时的校读功能。;;; 又称 DnaG ( dnaG 基因产物)。 作用是催化形成短片段的RNA引物,在其3`-OH端开始复制。图 ? 引物 (primer):由引物酶催化合成的短链RNA分子。约十数个至数十个核苷酸。?;; (二)DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase) 拓扑:指物体或图像作弹性移位而又保持物 体不变的性质。 复制解链中的DNA分子绕双螺旋轴高速解链旋转(旋转100次/秒),会造成解链前方的DNA分子缠绕打结。 拓扑异构酶改变DNA分子拓扑构象,解除DNA分子缠绕打结。见图 ;拓扑酶I 1. 切断DNA双链中一

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