干细胞与组织工程-细胞工程PPT.ppt

哺乳动物的睾丸多在腹腔外，而其它物种却在腹腔内 鸡睾丸在体内深部，操作困难 鱼类精原干细胞移植 鱼类精原干细胞移植的途径 腹腔注射 腹腔手术开口移植 泄殖孔注射 鱼类精巢注射 外源基因直接导入 精原干细胞移植 精原干细胞的应用前景 雄性不育治疗 转基因动物生产 遗传资源保护 干细胞研究模型 定向分化 脐血干细胞 脐带血造血干细胞 脐带间充质干细胞 间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC） 是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名，具有亚全能分化潜能，在特定的体内外环境下，能够诱导分化成为多种组织细胞。间充质干细胞具有干细胞的共性，即自我更新、多向分化和归巢的能力。 [mese?kim?l] 间充质干细胞的特性 具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血支持细胞，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。 具有免疫调节功能，通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应 ，从而发挥免疫重建的功能。 具有来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，不存在免疫排斥的特性。 脐带间充质干细胞的可塑性 协和华东干细胞基因工程有限公司 自体储存脐带血干细胞 脐带间充质干细胞的优势 取材方便，不存在任何身体痛苦 数量丰富，每根脐带都含有大量的间充质细胞 移植不存在异体排斥问题 具有广泛的应用范围，可以向多种细胞类型分化，如中风、帕金森氏症等重大 疾病 可支持造血干细胞移植成活，并能降低移植物抗宿主病风险 间充质干细胞的应用 中风、帕金森氏症、老年痴呆症、过敏体质、脊髓损伤、肝病、心脏病、皮肤移植等。 随着间充质干细胞研究的不断深入以及干细胞工程技术产业化的持续发展，间充质干细胞的应用领域还将会逐渐扩大，应用价值也将会逐步提高。因此，保存脐带间充质干细胞是为保障未来健康未雨绸缪的最好手段。 间充质干细胞体外培养 脐带源间充质干细胞 脐带源间充质干细胞量丰富、增殖潜能高、免疫原性低、支持造血功能强，并且取材方便，其采集对母亲和胎儿没有任何不良影响。把脐带中的间充质干细胞储存下来，还可变废为宝，能为将来的临床应用提供快速可靠的来源，且自身使用没有组织配型的问题，供他人使用时产生严重免疫排斥反应的可能性较低，适用人群广泛。 费 用 新生儿的父母先一次性缴纳5800元的采集、检测、运输费用，以后每年缴纳500元保管费用，细胞库每年出示一份《脐带血干细胞基本情况报告》，并将自动获得30余万元保额的医疗保险。 用处很大？ 如果存下脐带血干细胞，孩子得了白血病、地中海贫血可以拿这个移植救命，损伤了神经、角膜，干细胞可以分化再生；亲人得了这类病，有1／4的希望可以配型成功移植。 精原干细胞 精原干细胞（spermatogonial stem cells, SSCs）位于睾丸生精小管基膜上，是永久分化成精子细胞的克隆源，既可以自我更新生成新的干细胞，又可以增殖分化形成各阶段的生精细胞直至成熟的精子。 对成年动物而言，精原干细胞是能将自身遗传信息传给下一代的惟一种子细胞。 精子发生与精原干细胞 精子发生是一个典型的干细胞系统，SSCs是精子形成的源泉，少数专门的SSCs可以在整个育龄期不断产生高度分化的精子。 精子发生: 精原干细胞→精原细胞→初级精母细胞→次级精母细胞→精子细胞 睾丸生精小管 生精上皮 精原干细胞是精子发生的源泉 精原干细胞 复制 分化 精原干细胞操作 体外培养 转基因操作 异体或异种移植重塑精子发生 冷冻保存 制备多能性干细胞 分离与体外培养 体外培养 移 植 移植器材 移 植 台盼蓝染料 精原干细胞体内原位移植(功能试验) 在1996年报道将大鼠SSCs移进免疫缺陷小鼠睾丸内可以生成大鼠的精子，异种移植取得成功 Clouthier DE, Avarbock MR, Maika SD, et al. Rat spermatogenesis in mouse testis. Nature. 1996, 381:418-421. 精原干细胞介导的转基因 由于SSCs可以进行冷冻保存、体外培养以及异体（或异种）移植，那么在移植前直接对活体SSCs进行基因转染和筛选，再进行移植和转基因的鉴定，便可高效地进行转基因研究，为转基因动物研究开拓了新的途径。利用SSCs已经成功地对一些哺乳动物进行了转基因研究，并在小鼠、大鼠中获得转基因动物后代。 转基因 第 7 章干细胞与组织工程 7.2 成体干细胞 成体干细胞 概念： 成体干细胞是在成体组织内具有自我更新能力并能分化产生一种或一种以上子代组织细胞的未成熟细胞。 成体干细胞 成体干细胞的特点 数量少，难以识别、分离纯化