荧光及荧光分析PPT.ppt

取代基的影响 给电子取代基 增强荧光 —NH2, —NHR, —NR2, —OH, —OR, 等 ?EM 285-365 nm 270-310 nm 310-405 nm 相对荧光强度 1.8 1.0 2.0 吸电子取代基 n 电子不与 ? 电子共轭 羰基类 1）n??* 跃迁禁阻，?小，10-2 2）最低单重态为 n, ?* 型，易于ISC。荧光弱，磷光强 非荧光 强荧光 取代基的位置 1） 有利于电子离域的，则荧光增强。 因此，一般邻位、对位给电子基团导致荧光增强。 2）有利于形成环，导致分子刚性增大，荧光增强。 荧光强度较弱 荧光强度较强 重原子效应 重原子降低荧光但增强磷光 如苯环被卤素取代，从氟苯到碘苯，荧光逐渐减弱到消失，该现象也称重原子效应。 ?F 0.22 10-5 ?P 0.14 0.43 ?P 1.9 s 0.024 s 重原子效应 不含有杂原子（N,O,S）的有机化合物均属于这一类，其特点是自旋允许跃迁，?大，?104，荧光强 ?, ?* 1) 含有杂原子（N,O,S）的有机化合物多属于这一类，含有n 电子，其特点是自旋禁阻 ，? 小，?102, ISC速率大，荧光弱。 2) n 轨道的能量受环境的影响大，如质子化或生成氢键等，将使n 轨道的能量降低，导致n??*跃迁的能量增大。荧光分子的最低激发态可能变成?,?*。 分为两类 含氮杂环有机物 含羰基杂原子有机物 n, ?* 最低单重态的性质 含氮杂环有机物 荧光随溶剂极性的增大而增强 例1 喹啉 介质 苯 乙醇 水 相对荧光 1 30 1000 可以理解为N上的孤对电子与水形成氢键，使n轨道能量降低，从而使最低单重激发态由n, ?*变成?, ?*。 含羰基有机物 芳香类 S1与T1能级间隙小， ISC效率高，接近于1。 脂肪类 有微弱的荧光，ISC效率低一些 影响荧光的外界因素 （一）溶剂效应： ? 溶剂极性可增加或降低荧光强度 （改变?—?*及n—?* 跃迁的能量）； ? 与溶剂作用从而改变荧光物质结构来增加或降低荧光强度。 影响荧光的外界因素 （二）温度： 温度增加，荧光强度下降（因为内、外转换增加、粘度或“刚性”降低）。因此体系降低温度可增加荧光分析灵敏度。 影响荧光的外界因素 （三）pH值： 具酸或碱性基团的有机物质，在不同pH值时，其结构可能发生变化，因而荧光强度将发生改变；对无机荧光物质，因pH值会影响其稳定性，因而也可使其荧光强度发生改变。 pH 2 pH 13 pH7~12 外转移 指激发分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用及能量转移，使荧光或磷光强度减弱甚至消失。这一现象称为“熄灭”或“猝灭”。 荧光与磷光的根本区别： 荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的；而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。 无辐射跃迁 系间窜越 指不同多重态间的无辐射跃迁， 例如S1→T1就是一种体系间跨跃。 通常，发生体系间跨跃时，电子 由S1的较低振动能级转移至T1的 较高振动能级处。有时，通过热 激发，有可能发生T1→S1，然后 由S1发生荧光。这是产生延迟荧光的机理。 改变电子自旋，禁阻跃迁，通过自旋—轨道耦合进行。 无辐射跃迁 hvA hvF S1 T1 S0 hvP 荧光产生的基本原理 内转换（Internal Conversion，IC）: 对于具有相同多重度的分子，若较高电子能级的低振动能层与较低电子能级的高振动能层相重叠时，则电子可在重叠的能层之间通过振动耦合产生无辐射跃迁，如S2-S1；T2-T1。 系间跨跃（Intersystem Conversion，ISC）:系间跨跃是发生在两个不同多重态之间的无辐射跃迁，如从S1到T1，该跃迁是禁阻的。然而，当不同多重态的两个电子能层有较大重叠时，处于这两个能层上的受激电子的自旋方向发生变化，即可通过自旋-轨道耦合而产生无辐射跃迁，该过程称为系间跨跃。 荧光:分子电