第九章节 色谱分析法基础.ppt

第八章 色谱分析基础 一、 色谱法的特点、分类和作用 2.色谱法分类 (3)其他色谱方法 （二）按分离机理分类 吸附色谱法（AC）：利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力的差别而分离的方法。 分配色谱法（PC）：利用组分在液态固定相中溶解度不同而分离的方法，LLC与 GLC都属于PC法范围。 凝胶渗透色谱法（GPC）：利用组分分子大小不同在多孔固定相（凝胶）中的选择渗透而分离的方法，或称空间排阻色谱法（SEC）。 离子交换色谱法（IEC）：利用在离子交换剂上的亲和力的差别而分离的方法，其中，用于分离分析离子的IEC称离子色谱法（IC）。 毛细管电泳法（CE）：样品在毛细管的液体介质中，在电场力作用下得到分离的方法。 3.色谱法的特点 二、色谱分离过程 1. 气相色谱分离过程 2. 分配系数（ partion factor） K 分配系数 K 的讨论 3.分配比 （partion radio）k 4. 容量因子与分配系数的关系 5. 分配比与保留时间的关系 4. 区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参数，有三种表示方法： （1）标准偏差(?)：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 （2）半峰宽(Y1/2)：色谱峰高一半处的宽度 Y1/2 =2.354 ? （3）峰底宽(Y)：Y=4 ? 5.峰高h 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离 6. 色谱流出曲线的数学描述 一、塔板理论-柱分离效能指标 2.有效塔板数和有效塔板高度 3.塔板理论的特点和不足 二、 速率理论-影响柱效的因素 A─涡流扩散项 B/u —分子扩散项 C ·u —传质阻力项 2.载气流速与柱效——最佳流速 3. 速率理论的要点 三、 操作条件的选择 分离度:相邻两组分色谱峰保留值之差与两个组分色谱峰峰底宽度总和之半的比值。 第三节 定性定量分析一、色谱定性鉴定方法 2.利用文献保留值定性 3.保留指数 保留指数计算方法 4.与其他分析仪器联用的定性方法 二、 色谱定量分析方法 2. 定量校正因子 3.常用的几种定量方法 （1）归一化法： （2）外标法 （3）内标法 内标法特点 k为容量因子； Dg 、DL为扩散系数。 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL 即： C =（Cg + CL） 采用粒度小的固定相，可降低气相传质阻力。另外，可采用分子量小的气体（如H2、He）作载气，有利于使气相传质阻力减小，提高柱效。 降低固定液的液膜厚度，可减小液相传质阻力。另外，为保持适当的C，应控制适当的柱温。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，流速?，柱效?。 载气流速低时： 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，流速?,柱效? 。 H - u曲线与最佳流速： 由于流速对这两项完全相反的作用，流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值，即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。 以塔板高度H对应载气流速u作图，曲线最低点的流速即为最佳流速。 H = A + B/u + C·u (1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因。 (2)通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。 (3)速率理论为色谱分离和操作条件选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响。 (4) 各种因素相互制约，如载气流速增大，分子扩散项的影响减小，使柱效提高，但同时传质阻力项的影响增大，又使柱效下降；柱温升高，有利于传质，但加剧了分子扩散的影响，选择最佳条件，才能使柱效达到最高 区域宽度 ?tR 塔板理论 速率理论 ?Y ──色谱过程的热力学因素； ──色谱过程的动力学因素 保留值之差 分离度R 塔板理论和速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度。即柱效为多大时，相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响： 保留值之差──色谱过程的热力学因素； 区域宽度──色谱过程的动力学因素。 色谱分离中的四种情况如图所示： 色谱分离中的四种情况的讨论： ① 柱效较高，△K(分配系数)较大,完全分离； ② △K不是很大，柱效较高，峰较窄， 基本上完全分离； ③柱效较低，，△K较大,但分离的不好； ④ △K小，柱效低，分离效果更差。 R=0.8：两峰的分离程度可达89%； R=1：分离程度98%； R=1.5：达99.7%（相邻两峰完全分离的标准）。 塔板理论可知，有效塔板数n有效是评价柱效能的一项指标。