产D-乳酸重组大肠杆菌ptsG基因的敲除及其混合糖-生物技术通报.PDFVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 12 :221-226 产 D-乳酸重组大肠杆菌ptsG 基因的敲除及其混合糖 同步发酵 丁小云  顾健健  王永泽  赵锦芳  王金华  赵筱 （湖北工业大学轻工学部 发酵工程教育部重点实验室，武汉 430068） 摘 要 ： 为构建能够同时高效利用五碳糖和六碳糖发酵产D-乳酸的重组大肠杆菌工程菌，以能高效利用五碳糖发酵产D-乳 酸的大肠杆菌工程菌 JH13 为出发菌株，通过Red 同源重组技术敲除葡萄糖跨膜转运基因 。实验结果表明， 缺陷菌 E.coli ptsG ptsG 株E.coli JH15 在 10% 混合糖 （5%葡萄糖和5% 木糖）培养基中发酵，可同时利用五碳糖和六碳糖以完成发酵 ；而对照菌葡萄糖 消耗完才利用木糖，发酵结束还有 18 g/L 木糖残留 ；JH15 乳酸产量为83.04 g/L，相比于对照菌株提高了25.86% ；在稻草秸秆水解 液中发酵，JH15 同时利用葡萄糖、木糖和L-阿拉伯糖，乳酸产量为25.15 g/L，转化率为86.42%。JH15 作为能利用混合糖同步发 酵产D-乳酸的大肠杆菌工程菌，它的成功构建为利用廉价的木质纤维素水解物为原料发酵生产D-乳酸提供参考依据。 关键词 ： 重组大肠杆菌工程菌 ；D-乳酸 ； 基因 ；Red 同源重组；混合糖 ptsG DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.12.032 The Knockout of Gene ptsG of Recombinant Escherichia coli Producing - D lactic Acid and the Simultaneous Fermentation of Mixed Sugars Ding Xiaoyun Gu Jianjian Wang Yongze Zhao Jinfang Wang Jinhua Zhao Xiao （Key Laboratory of Fermentation Engineering of Ministry of Education ，Hubei University of Technology ，Wuhan 430068 ） Abstract: In order to construct a recombinant engineering Escherichia coli strain that yields D-lactic acid in the simultaneous efficient fermentation of pentose and hexose, having an engineering E. coli JH13 that efficiently ferment the pentose to produce D-lactic acid as an original strain, a glucose transmembrane transporter gene was knocked out by the technique of Red homologous recombination. The fermentative