嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链Fd片段The.PDFVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 摇 圆园园源 杂藻责；员员（猿）：员远员耀员远缘 悦澡蚤灶 允 悦葬灶糟藻则 月蚤燥贼澡藻则 ·员远员· ［文章编号］摇 员园园苑鄄猿愿缘载（圆园园源）园猿鄄园员远员鄄园缘 嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链云凿片段 员 员 圆 圆 圆 包国强 ，马庆久 ，邢金良 ，杨向民 ，陈志南（员援 第四军医大学唐都医院普通外 ，西安摇 苑员园园猿愿；圆援 第 四军医大学基础部细胞工程研究中心，西安摇 苑员园园猿圆） ［摘摇 要］摇 目的：利用噬菌体抗体库和导向选择技术，以抗匀粤遭员愿郧嵌合抗体轻链为模板，筛选人源性抗肝癌抗体云凿片段。 方法：利用砸栽鄄孕悦砸 自肝癌患者外周血淋巴细胞中扩增全套人抗体重链云凿 基因片段，克隆入含嵌合 蕴 链的展示载体 责悦燥皂遭猿载，建立人原鼠杂合云葬遭噬菌体抗体库。然后，利用大肠杆菌表达的非融合 匀粤遭员愿郧 为抗原进行亲和筛选，利用 责Ⅲ 苑 融合抗体的形式进行克隆鉴定，并对筛选出的杂合抗体进行初步的功能检测。结果：构建成功库容量为圆 伊员园 孕云哉 的杂合 人鄄鼠噬菌体抗体库，利用非融合表达的匀粤遭员愿郧 进行远轮筛选。 蕴陨杂粤及流式细胞仪检测，其中苑个克隆呈特异性阳性反 应。其中克隆粤孕远鄄圆和粤孕远鄄苑亲和力较高，测序显示其基因序列相同，且与亲本抗体恒定区序列相同，属陨早郧圆亚类，可变区属 灾匀猿家族。结论：通过本实验，利用嵌合轻链为模板，进行云凿片段替换，成功筛选到人源性抗体云凿片段。 ［关键词］摇 噬菌体抗体库；肝癌；导向筛选 ［中图分类号］摇 砸猿怨圆援员员 ［文献标识码］摇 粤 栽澡藻 杂糟则藻藻灶蚤灶早 燥枣 匀怎皂葬灶 粤灶贼蚤鄄匀藻责葬贼燥皂葬 云凿 云则葬早皂藻灶贼泽 郧怎蚤凿藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 悦澡藻皂藻则蚤糟 蕴蚤早澡贼 悦澡葬蚤灶 燥枣 匀粤遭员愿 员 员 圆 圆 圆 月粤韵 郧怎燥鄄择蚤葬灶早 ，酝粤 匝蚤灶早鄄躁蚤怎 ，载陨晕郧允蚤灶鄄造蚤葬灶早 ，再粤晕郧载蚤葬灶早鄄皂蚤灶 ，悦匀耘晕 在澡蚤鄄灶葬灶 （员 栽葬灶早凿怎 匀燥泽责蚤贼葬造 燥枣 云燥怎则贼澡酝蚤造蚤贼葬则赠 酝藻凿蚤糟葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，载蚤忆葬灶 苑员园园猿愿，悦澡蚤灶葬；圆 悦藻造造 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早 悦藻灶贼藻则 燥枣 云燥怎则贼澡 酝蚤造蚤贼葬则赠 酝藻凿蚤糟葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，载蚤忆葬灶 苑员园园猿圆，悦澡蚤灶葬 ） ［粤遭泽贼则葬糟贼］ 遭躁藻糟贼蚤增藻：栽燥 泽藻造藻糟贼 葬灶贼蚤鄄匀粤遭员愿郧（澡藻责葬贼燥皂葬葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿葬灶贼蚤早藻灶）澡怎皂葬灶 云凿枣则葬早皂藻灶贼泽憎蚤贼澡 早怎蚤凿藻凿 泽藻造藻糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴 糟澡葬蚤灶 燥枣 糟澡蚤皂藻则蚤糟 云葬遭鄄匀粤遭员愿援酝藻贼澡燥凿泽：栽澡藻 澡怎皂葬灶 云凿 则藻责藻则贼燥则蚤藻泽 早藻灶藻泽憎藻则藻 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 遭赠 砸栽鄄孕悦砸枣则燥皂 孕月酝悦 燥枣 澡藻责葬贼燥皂葬 责葬贼蚤藻灶贼泽，葬灶凿 糟造燥灶藻凿 蚤灶贼燥 贼澡藻 增藻糟贼燥则 责悦燥皂遭猿载 憎蚤贼澡 糟澡蚤皂藻则蚤糟 蕴 糟澡葬蚤灶 贼燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 贼澡藻 澡怎皂葬灶鄄皂燥怎泽藻 澡赠遭则蚤凿 云葬遭 责澡葬早藻 造蚤遭则葬则赠援 匀粤遭员愿郧 ，藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 则藻早蚤燥灶 燥枣 匀粤遭员愿郧，憎葬泽 怎泽藻凿 葬泽 葬灶贼蚤早藻灶 贼燥 泽糟则藻藻灶援 栽澡藻 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟造燥灶藻泽 憎葬泽 燥遭鄄 贼葬蚤灶藻凿 遭赠 蕴陨杂粤 葬灶凿 云悦酝 憎蚤贼澡 责 鄄枣怎泽蚤燥灶 云葬遭 葬灶贼蚤遭燥凿赠援 栽澡藻 阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿援 砸藻泽怎造贼泽：粤 澡怎皂葬灶鄄皂燥怎泽藻 Ⅲ 云葬遭 葬灶贼蚤遭燥凿赠 造蚤遭则葬则赠 憎藻则藻 糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿 憎蚤贼澡 圆 伊员园苑 孕云哉援 粤枣贼藻则 远 则燥怎灶凿泽 责葬灶灶蚤灶早，