有丝分裂雌核发育牙鲆的微卫星鉴定-中国水产科学.PDFVIP

第17卷第5期 中国水产科学 Vol.17 No.5 2 0 1 0 年 9 月 Journal of Fishery Sciences of China September 2010 有丝分裂雌核发育牙鲆的微卫星鉴定 1，2 2 ，3 1 1 4 4 刘海金 ，陆桂 ，王晓梅 ，刘永新 ，王玉芬 ，王桂兴 （1. 中国水产科学研究院，北京 100141；2. 中国水产科学研究院 鲆鲽类遗传育种功能实验室，河北 秦皇岛 066100；3. 上海海洋 大学 水产与生命学院，上海 201306；4. 中国水产科学研究院 北戴河中心实验站，河北 秦皇岛 066100） 摘要：通过静水压抑制卵裂方法获得多个牙鲆（ ）有丝分裂雌核发育家系，在仔鱼阶段经历大批死 Paralichthys olivaceus 亡后，将各个家系残存的个体混合饲养，24个月后获得1批存活个体。利用11对微卫星分子标记，对173尾有丝分裂雌 核发育牙鲆进行分析，结果表明，其中111尾在11位点全部纯合，62尾在部分位点杂合，平均杂合子比例为0.233 8。11 个位点的等位基因数为4 ～8，平均等位基因数为5.033 6，有效等位基因数为2.042 1 ～5.126 8，平均有效等位基因数为 3.281 5。采用NJ法对111尾纯合牙鲆的亲缘关系进行聚类分析，可分为4群。微卫星标记鉴定结果表明，通过静水压抑 制卵裂法可以获得完全纯合的牙鲆，但有部分杂合个体出现。分析其原因，可能是由于某些卵子发育不同步，静水压抑 制其第二极体排出而非全部抑制卵裂，导致减数分裂雌核发育所致。［中国水产科学，2010，17（5）：889-894］ 关键词：牙鲆；有丝分裂雌核发育；纯合性；亲缘关系；微卫星 中图分类号：Q959.486；S917　　　　文献标识码：A　　　　 文章编号：1005-8737-（2010）05-0889-06 人工诱导雌核发育作为细胞工程育种的一种 在20世纪80年代，日本学者曾利用有丝分裂雌核发 新技术，是快速建立纯系的有效手段，在鱼类染色体 育技术成功克隆出牙鲆 ［11］ 。中国近年应用有丝分 操作、遗传改良以及性别控制等方面都具有潜在的 裂雌核发育技术也培育出纯合牙鲆，并将微卫星标 应用价值 ［1］ 记技术应用于有丝分裂雌核发育的研究，如朱晓琛 。迄今为止，人们已经对20种鱼类成功 诱导有丝分裂雌核发育 ［2］ 等 ［7］ 。关于有丝分裂雌核发 利用8个微卫星位点检验了有丝分裂雌核发育 育的鉴定，过去多采用组织移植和同工酶标记的方 牙鲆幼体的纯合性，指出有丝分裂雌核发育一代即 法 ［3-5］ 可形成纯合子；季旭等 ［12］ ，但是组织移植法不能从分子水平上揭示其 对纯合牙鲆做了亲子鉴定 遗传信息；同工酶可供检测的座位较少，多态性低， 实验，证明了微卫星标记技术是进行亲子鉴定的有 大大限制了它的应用。随着科学技术的进步，新的 利工具，但是运用微卫星标记技术对有丝分裂雌核 分子标记不断被开发出来。微卫星作为一种新的分 发育牙鲆的遗传特性研究尚无报道。 子标记技术，具有信息量丰富，多态性高，呈共显性 本研究利用微卫星标记对发育成熟的有丝分裂 遗传等特点 ［6］ 雌核发育牙鲆的纯合性和微卫星位点多态性进行了