沉默调节蛋白1促进体外神经元的轴突生长.pdf

14年 第4O卷 第6 321 · 论 著 沉默调节蛋白1促进体外神经元的轴突生长☆ 梁海乾 李晓红 王景景 涂悦 陈种 张赛 【摘要】目的探讨沉默调节蛋白l(Sirt1)对神经元轴突生长的影响。方法体外原代分离培养胚胎海马神经 元 ，观察Sirtl在72h神经元的分布表达 ；通过RNAi技术下调Sirtl基 因，观察其对72h神经元轴突长度的影响； 通过质粒转染过表达Sirtl基因或药物 白藜芦醇(RES)激活Sirtl蛋白，检测其对72h神经元轴突长度的影响。结 果 免疫荧光染色结果显示Sirtl位于海马神经元的生长圆锥以及胞体和突起 ，尤其是轴突末端 ；与正常对照组 (Sirtl正常表达组)相比，Sirtl表达下调可显著缩短72h海马神经元轴突的长度 [由(178．3+3．2)m缩短~Jl(110．2± l8．30)Ixm，P0．O1】；与正常对照组(Sial正常表达组)相比，基因过表达Sirtl可显著增加72h海马神经元轴突的 长度 【由(178．3~3．2)Ixm增长到 (310．6~39．5)Ixm，P0．01】。与药物对照组 (DMSO处理组)相 比，药物RES激活 Sirtl蛋 白亦可显著增加72h海马神经元轴突的长度 [由(292．8+11．2)m增长~]1(525．1~49．7)Ixm，P0．01】。结 论 Sirtl在神经元的轴突生长 中起着重要的作用，可作为轴突再生一个潜在的治疗靶点。 【关键词】Sirtl轴突生长 白藜芦醇神经元 【中图分类号】R741 文【献标识码】A Silenceregulatory protein 1 promotesaxonaloutgrowth in vitro．LlANG Haiqian．L，Xiaohong,WANG Jingfing,TUYue，CHENChong,ZHANGSai．InstituteofTraumaticBrainInjuryandNeurology,BrainHospitalofAffili— atedHospitalofLogisticsUniversityofChinesePeopleArmedPoliceForces，Tianjin300162，China．Tel：022 A【bstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofsilenceregulatoryprotein1(Sirt1)onaxonaloutgrowth．Methods Thehippocampalneuronswasfirstisolatedinvitrofrom ratembryos．ThedistributionandexpressionofSirtlwerethen detected72 hlater．Thedown-reuglationofSirtlwasinducedbyRNAitechnologyandup—regulationofSirtlwasin— ducedbyoverexpressionofSirtlandresveratrol(RES)．Immunofluorescencestainingwasusedtoexaminethexaon length．ResultsImmunofluorescencestainingshowedthatSirt1waslocatedinneuronalcellbodyandneurite，especially inthedistalaxons．Down—regulationofSirtlsignificantlydecreasedaxonallengthcomparedwithsiRNA controlgroup [(178．3~3．2)IxmYS．(110．2±18．30) m，PO．O1】；OverexpressionofSirtlsi