重视碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌的检测(孙长贵-兰州).ppt

其他型碳青霉烯酶分布 * 解放军第一一七医院检验科 * 四、实验室检测 * 解放军第一一七医院检验科 * 四、实验室检测 由碳青霉烯酶介导的耐药，在临床实验室可通过常规表型试验方法来检测，包括纸片扩散法和改良Hodge试验。最终鉴定需检测耐药基因来进行确认。 * 解放军第一一七医院检验科 * 表型检测－纸片扩散、MIC Etest * * 解放军第一一七医院检验科 CLSI推荐解释标准M100文件 表型检测－纸片扩散法 药物 CLSI M100-S19 CLSI M100-S 23 S I R S I R 多利培南 － － － ≥23 20-22 ≤19 厄他培南 ≥19 16-18 ≤15 ≥23 20-22 ≤19 亚胺培南 ≥16 14-15 ≤13 ≥23 20-22 ≤19 美罗培南 ≥16 14-15 ≤13 ≥23 20-22 ≤19 解放军第一一七医院检验科 表型检测－MIC法 * 解放军第一一七医院检验科 * 药物 CLSI M100-S19 CLSI M100-S 23 S I R S I R 多利培南 － － － ≤1 2 ≥4 厄他培南 ≤2 4 ≥8 ≤0.25 0.5 ≥1 亚胺培南 ≤4 8 ≥16 ≤1 2 ≥4 美罗培南 ≤4 8 ≥16 ≤1 2 ≥4 耐药酶表型检测 * 解放军第一一七医院检验科 * KPC-产生菌实验室检测： 问题: 1、某些分离菌株被证明低水平对碳青霉烯类耐药 2、某些自动化系统缺泛检测低水平碳青霉烯类耐药 　　的能力。 碳青霉烯酶表型试验 改良Hodge试验（Modified Hodge Test ） 100% sensitivity in detecting KPC; also positive when other carbapenemases are present 100% specificity Procedure described by Lee et al. CMI, 7, 88-102. 2001. * * 解放军第一一七医院检验科 Modified Hodge Test Lawn of E. coli ATCC 25922 1:10 dilution of a 0.5 McFarland suspension Imipenem disk Test isolates Described by Lee et al. CMI, 7, 88-102. 2001. * 解放军第一一七医院检验科 * 双纸片协同试验－金属酶 * * 解放军第一一七医院检验科 双纸片增效试验 * * 解放军第一一七医院检验科 KPC 、NDM-1等酶产生菌最终确定 PCR 检测耐药基因 确认方法 * * 解放军第一一七医院检验科 * 解放军第一一七医院检验科 解放军第一一七医院检验科 重视碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌的检测孙长贵解放军第一一七医院检验科南京军区医学检验质量控制中心 * * 解放军第一一七医院检验科 主要内容 一、碳青霉烯类抗生素 二、碳青霉烯类抗生素耐药机制 三、产碳青霉烯酶菌株流行与分布 四、实验室检测 * 解放军第一一七医院检验科 * 一、碳青霉烯类抗生素 碳青霉烯类抗生素是抗菌谱最广，抗菌活性最强的β-内酰胺类抗生素，因其具有对β-内酰胺酶稳定以及毒性低等特点，已经成为治疗严重细菌感染最主要的抗菌药物之一。 其结构与青霉素类的青霉环相似，不同之处在于噻唑环上的硫原子为碳所替代，且C2与C3之间存在不饱和双键；另外，其6位羟乙基侧链为反式构象。 研究证明，正是这个构型特殊的基团，使该类化合物具有超广谱的、极强的抗菌活性，以及对β-内酰胺酶高度的稳定性。 * 解放军第一一七医院检验科 * * 解放军第一一七医院检验科 * 药物 研制公司 上市年份 亚胺培南 美国默沙东 1985年 美罗培南 日本住友，英国I-IC 1995年 厄他培南 多利培南 美国默沙东 日本盐也义公司 2002年 2005年 帕尼培南 比阿培南 日本三共株式会社 Wyeth-lederle实验室 1994年 2002年 碳青霉烯类-种类 目前中国上市的碳青霉烯类 * 解放军第一一七医院检验科 * 国内已经上市的品种有： 亚胺培南，美洛培南，帕尼培南， 法罗培南，厄他培南，比阿培南。 碳青霉烯类作用机制 碳青霉烯类抗生素作用方式都是抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（PBPs），从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀致使细菌胞浆渗透压改变和细胞溶解而杀灭细菌。 * 解放军第一一七医院检验科 * 非发酵革兰阴性杆菌对三种碳青霉烯的敏感性 中国抗感染化疗杂志2002年3月30日第二卷第一期 (1