β葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析本科毕业论文.doc

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β葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析本科毕业论文

学科分类号: 081801 本科学生毕业论文 题 目(中文):β-(英文):Isolation and identification of β-glcosidase-producing strain and research on the enzymatic characteristics 姓 名 学 号 院 (系) 专业、年级 2009级 指导教师 2013年月日摘 要 I Abstract II 第1章 绪论 1 1.1 β-葡萄糖苷酶介绍 1 1.2 β-葡萄糖苷酶的酶族分类 1 1.3 产β-葡萄糖苷酶的分布来源 1 1.4 β-葡萄糖苷酶的理化性质 2 1.5 β-葡萄糖苷酶的应用及前景展望 2 1.6 国内外有关本选题的研究动态 2 1.7 本选题的意义 3 第2章 材料与方法 4 2.1 材料、仪器与试剂 4 2.1.1 材料 4 2.1.2 实验仪器 4 2.1.3 试剂及药品 4 2.2 实验方法 4 2.2.1 实验步骤 4 2.2.2 菌种鉴定 5 2.3 酶学性质实验 6 2.3.1 酶的最适反应pH 6 2.3.2 酶的最适反应温度 6 2.3.3 金属离子对酶活的影响 6 第3章 结果与讨论 7 3.1 β-葡萄糖苷酶产生菌的初筛 7 3.2 β-葡萄糖苷酶产生菌的复筛和酶活测定 7 3.2.1 复筛 7 3.2.2 β-葡萄糖苷酶酶活测定 7 3.3 菌种鉴定 8 3.3.1 显微形态观察 8 3.3.2 菌落形态观察 8 3.3.3 生理生化实验 9 3.3.4 革兰氏染色反应 9 3.4 酶学性质的研究 9 3.4.1 β-葡萄糖苷酶的最适pH 9 3.4.2 β-葡萄糖苷酶的最适温度 10 3.4.3 金属离子对酶活的影响 11 第4章 结论与讨论 13 4.1 讨论 13 4.2 结论 14 参考文献 15 致 谢 17 β-葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析 摘 要 β-葡萄糖苷酶(EC. 3. 2. 1. 21)又称纤维二糖酶,它属于纤维素酶类,是纤维素分解酶系中的重要组成成分。本实验的目的是分离获得β-葡萄糖苷酶高产菌株,确定该菌类的分类地位,并对其所产的β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行初步研究。本实验是采用七叶灵显色法从土壤样品中筛选β-葡萄糖苷酶产生菌,再用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)显色法进行复筛;通过形态特征、生理生化特征等方法确定其分类学地位;以PNPG为底物, 测定β-葡萄糖苷酶的最适反应pH及最适反应温度。实验发现从土壤样品中筛选出的高产菌株ZF-6C,初步鉴定为Bacillus korlensis。芽孢杆菌中ZF-6C,最适反应pH和温度分别为7.0和40℃;金属离子Ca2+、Pb+增加酶活,而Cu2+、Fe2+抑制酶活。从芽孢杆菌中分离得到β-葡萄糖苷酶,芽孢杆菌ZF-6C所产β-葡萄糖苷酶从最适合的反应条件pH和温度方面,分析可能为一有高催化效率β-葡萄糖苷酶。 【关键词】β-Isolation and identification of β-glycosidase-producing strain and research on the enzymatic characteristics Abstract Beta - glycosidase enzymes (EC. 3. 2. 1. 21) also called cellobiase, it belongs to the cellulose enzyme, is the important component of cellulolytic enzymes. The discretion of the enzyme activity directly affect the overall of cellulose enzyme activity. The purpose of this experiment is separation of beta - glycosidase - production strains from soil, to clarify the taxonomic status, and to study the enzymatic characteristics of the β-glycosidase A β-glycosidase-producing strain

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