TSA通过抑制STAT1磷酸化与核转位下调人肝癌细胞HepG2内I的表达英文文献.pdfVIP

中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology，2011，31(9)：1—7 TSA通过抑制 STAT1磷酸化与核转位下调 人肝癌细胞 HepG2内 IDO的表达水 李玲玲 江冠民 张 革 衣艳梅 张 帆 杜 军 (中山大学药学院微生物与生化制药实验室 广州 510006) 摘要 目的：研究曲古抑菌素A(TrichostatinA，TSA)下调 ^y干扰素(interferon-gamma，IFN一)诱 导的人肝癌细胞HepG2内吲哚胺 2，3一双加氧酶(indoleamine2，3一dioxygenase，IDO)表达的分 子机制。方法：Westernblot检测TSA在 IFN-^y诱导的HepG2细胞中IDO的表达、信号转导及转 录激活子 1(STAT1)的磷酸化和干扰素调节因子 l(IRF一1)的诱导表达情况。用免疫细胞化学法 检测TSA处理HepG2细胞后对IDO表达的影响。流式细胞术分析TSA处理后IFN．^y受体2表达 量的变化，进一步在激光共聚焦显微镜下观察TSA对STAT1核转位的影响，利用双荧光素酶报告 基因系统检测TSA对 IFN一-,／激活位点 (-,／一activatedsites，GAS)、干扰素刺激应答元件 (interferon stimulatedresponseelements，ISRE)和核 因子 一KB (NF．KB)的激活的影响。结果 ：TSA以剂量依 赖方式下调 HepG2细胞 内IFN一^y诱导的IDO表达、能明显抑制STAT1第701位酪氨酸的磷酸化 和STAT1的核转位，但是上调 IFN．受体2受体的表达。双荧光素酶报告基因分析和 Western blot结果表明：TSA能显著抑制GAS和 IRF一1的激活却不能抑制NF-KB和 ISRE的激活。结论： TSA能下调 IFN一^y诱导的HepG2细胞中IDO的表达，其机制可能是与其抑制STAT1的磷酸化和 核转位，以及抑制STAT1与GAS的结合有关，而不是通过下调 IFN一受体的表达来实现的。 关键词 TSA STATl 核转位 肝癌 IDO 中图分类号 R73—3 肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率高、预 特点和优势，对多种实体瘤及血液系统肿瘤具有显著 后较差。 抑制作用 引，因而被认为是一种非常有前景的新型抗 曲古菌素A(TfichostatinA，TSA)是链霉素代谢 肿瘤药物 。 产物，也是第一个来源于天然产物的组蛋 白去乙酰化 吲哚 胺 2，3双 加 氧 酶 (indoleamine2，3一 酶抑制剂(histonedeacetylaseinhibitor，HDACi)，可特异 dioxygenase，IDO)，是一种含亚铁血红素的酶，也是催 性抑制哺乳动物组蛋白去乙酰化酶，使组蛋白高乙酰 化色氨酸沿犬尿氨酸途径分解代谢的关键限速酶。人 化、激活基因表达、抑制细胞增殖、引起细胞分化或凋 类 IDO基因位点位于第8号染色体上，为单拷贝基因， 亡 ，与传统的细胞毒性抗肿瘤药物相 比，它有明显的 在启动子端含多个重复序列元件，可对 ^y干扰素 (interferon^y，IFN．^y)的刺激产生反应 。研究表明 收稿 日期 ：2011-05—16 修回日期：2011-o6一D4 IDO是导致肿瘤免疫耐受的重要因素之一 。 {国家 自然科 学基金 81071712)、国家 “973”计划 近来有研究表 明，短链脂肪酸类 HDACi丁酸钠 (2011CB935800)、中国博士后科学基金 (20100470976)资助项 目 (sodiumbutyrate，NaB)能够下调IFN一-y诱导的鼻咽癌 通讯作者，电子信箱 ：dujun@mail．sysu．edu．cn 细胞内IDO的表达 ，那么氧肟酸类 HDACi-TSA是 2